最新单核苷酸多态性(snp)教学讲义PPT.ppt

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1、单核苷酸多态性(snp)讲义结构定义特点应用定义SNP（singlenucleotidepolymorphism）：个体间基因组DNA序列同一位置单个核苷酸变异所引起的多态性。SNP所表现的多态性只涉及到单个碱基的变异，可由单个碱基转换、颠换、插入或缺失引起，但通常所说的SNP是指转换或颠换。转换：嘌呤被嘌呤或嘧啶被嘧啶替换C→TG→A颠换：嘌呤被嘧啶或嘧啶被嘌呤替换C→AG→TSNP的应用1、等位基因特异性杂交（ASH）TaqMan探针技术、DASH、分子信标技术2、内切酶酶切技术RFLP、随

2、机扩增多态DNA（RAPD）、引物入侵分析技术3、引物延伸法测序法、等位基因特异性延伸法4、寡核苷酸连接分析（OLA）TaqMan探针法PCR扩增时，加入一个引物和一个TaqMan探针，探针两端分别有报告荧光基团和淬灭荧光基团，PCR扩增时，Taq酶5’核酸酶将探针酶切降解，使报告荧光基团与淬灭荧光集团分开而发出荧光。因为Taq酶5’核酸酶只能降解与目标序列相同的序列，所以可以根据荧光信号来区分等位基因类型。SNP位点分析纯和（G/G)杂交（G/T)不需要洗脱或分离等PCR后处理过程分子信标技术

3、检测SNP原理引物入侵分析技术检测SNP等温反应，不依赖PCR扩增、直接从基因组DNA进行SNP检测结语由于SNP检测在后基因组计划中的重要性，高通量检测SNP的新技术正在不断发展。从目前已有的报道来讲，检测方法主要集中在综合利用纳米材料技术、多重PCR技术、各种荧光探针设计和荧光标记技术。检测技术方面，PCR无疑是最为理想最有发展潜力，但仍然存在问题，如检测成本高、重复性不够好。需要我们的努力来改进。THANKS！肝功检查梅河口市新华医院第一节肝脏的基本功能肝脏是人体内的最大腺体，基本功能有物

4、质代谢功能，分泌、排泄、生物转化及胆红素代谢等。(一)代谢功能蛋白代谢：90％以上的蛋白质及全部清蛋白、多种凝血因子都是由肝细胞合成，部分球蛋白也由肝脏合成。糖代谢：肝脏能使血糖浓度保持恒定。脂类代谢：参与脂类的消化、吸收、分解、合成及运输等代谢过程。维生素及激素代谢：脂溶性维生素的吸收，激素的灭活；胆红素、铁、铜及其他金属的代谢等。(二)生物转化作用肝脏通过氧化、还原、水解、结合等过程对体内代谢产物及有毒物质进行生物转化，增加其水溶性以利排出体外。(三)分泌与排泄功能肝细胞分泌胆汁，排泄代谢产

5、物(如胆固醇、胆色素)以及药物、解毒产物。第二节肝脏病常用的实验室检查一、蛋白质代谢功能检查除γ球蛋白以外的大部分血浆蛋白，如清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、多种凝血因子、抗凝因子、纤溶因子及各种转运蛋白等均由肝脏合成，当肝细胞受损时这些血浆蛋白质合成减少。γ球蛋白系免疫球蛋白，由B淋巴细胞及浆细胞所产生，当肝脏受损，尤其是慢性炎症时，刺激单核—吞噬细胞系统，球蛋白生成增加。尿素合成减少，血氨升高，临床上表现为肝性脑病。因此。通过血浆蛋白含量，及蛋白组分的分析，凝血因子含量及血氨浓度检验，借以了解肝细胞

6、有无损伤及其损伤程度。严重肝病血浆凝血因子合成减少，临床上出现皮肤粘膜出血倾向。(一)血清总蛋白和清蛋白、球蛋白比值测定原理：90％以上的血清蛋白(serumtotalprotein，STP)和全部清蛋白(albumin)由肝脏合成，因此血清总蛋白和清蛋白检测是反映肝脏功能的重要指标。清蛋白是正常人体血清中的主要蛋白质组分，肝脏每天大约合成120nm／kg，半衰期15~19天。[参考值范围]正常成人血清总蛋白60-80g／L清蛋白40--55g／L球蛋白20-30g／LA／G为1.5-2.5:1

7、[临床意义]1.血清总蛋白及清蛋白增高主要由于血清水分减少，总蛋白浓度增加，而全身总蛋白量并未增加，如急性失水、肾上腺皮质功能减退等。①肝细胞损害：常见肝脏疾病有亚急性重症肝炎，慢性中度以上持续性肝炎、肝硬化、肝癌等。清蛋白减少常伴有γ球蛋白增加，清蛋白含量与有功能的肝细胞数量呈正比，持续下降，提示肝细胞坏死进行性加重，预后不良，治疗后清蛋白上升，提示肝细胞再生，治疗有效。总蛋白<60g或清蛋白<25g／L称为低蛋白血症，临床上常出现严重浮肿及胸，腹水。2．总蛋白及清蛋白降低②营养不良：摄入不足

8、或消化吸收不良。③蛋白丢失过多：如肾病综合征,蛋白丢失性肠病、严重烧伤．急性大失血等。④消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤等。⑤血清水分增加：水钠潴留或静脉补充过多的晶体溶液。较少见有先天性低清蛋白血症。血清总蛋白及清蛋白降低总蛋白>80g／L或球蛋白>35g／L，称为高蛋白血症或高球蛋白血症。总蛋白增高主要是球蛋白增高，其中又以γ球蛋白增高为主，常见原因①慢性肝脏疾病：慢性肝炎、肝硬化、酒精性肝病等。球蛋白增高程度与肝脏病严重性相关。②M蛋白血症：多发性骨髓瘤、淋巴瘤、原发性巨球蛋白血症等。③自身