最新全氟辛烷磺酸对大鼠海马神经细胞内钙离浓度的影响-药学医学精品资料.ppt

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1、最新全氟辛烷磺酸对大鼠海马神经细胞内钙离浓度的影响-药学医学精品资料是全氟碳化物(Perfluorinatecompounds,PFCs)中的重要化合物之一。广泛应用于纸制品、杀虫剂、涂料和洗涤剂等民用和工业产品生产领域。O-PerfluorooctanesulfonatePFOSC8F17SO3-PFOS在自然环境和生物体内具不分解性和高蓄积性;环境调查结果表明:全球范围内各类水体以及包括北极在内的所有野生动物血液中都存在PFOS污染;人群调查资料显示:全球范围内各国家人体血液中均检测出较高水平的PFOS污染;毒理学实验证实了PFOS对实验动物具有发育毒性、免疫毒性、生殖

2、毒性和潜在致癌性。引起许多国家环境学家和毒理学家的关注;生态系统中PFOS环境污染及其毒性[Ca2+]i测定方法大鼠调整细胞浓度至1×106个/ml戊巴比妥钠麻醉剥离海马,剪碎0.25%(W/V)胰蛋白酶37℃恒温水浴消化200目筛网滤过800r/min离心2.0ml细胞悬液中加入5.0µl2µmol/L的Fura-2/AM和3.0µl0.05%(v/v)的Pluronic-F127,振荡恒温水浴(37℃)45min1000r/min离心5minHepes-Hank’s清洗细胞D-Hank’s液定容细胞悬液至1.0mL室温放置20minHepes-Hank’s液重悬细胞至2

3、ml以激发光波长340nm和380nm,发射光波长510nm测定荧光强度比值(R)加入破膜剂10%(v/v)TritonX-1003.0µL测定最大荧光比值(Rmax)待曲线平稳后加入螯合剂0.3mol/LEDTA17.0µL测定最小荧光比值(Rmin)测定条件测定设备:日立F-4500荧光双波长分光光度计测定步骤:测定结果:实际钙离子浓度计算由日立F-4500钙定量测定系统自动求出海马细胞Fura-2/AM负载照片注:箭头所指为Fura-2/AM与细胞内游离钙离子结合细胞注:箭头()表示加入相应试剂时间点海马细胞细胞内钙离子浓度测定图谱TritonX-100EDTAPFO

4、S剂量和[Ca2+]i剂量效应关系600141.30222.27244.29381.69528.27015030045002832128PFOSDose(mg/kg•feed)[Ca2+]i(nmol/L)[Ca2+]i(nmol/L)=214.533+2.618PFOS(mg/kg·feed)(r=0.929,P<0.05)P<0.05P<0.01结论1.PFOS使大鼠海马神经细胞[Ca2+]i增高。2.有关PFOS引起中枢神经系统内谷氨酸含量增加的机理、对钙离子通道和其他神经递质释放的影响有待于今后的研究证明。谢谢!1aoe(第二课时)声调歌一声平二声扬三声拐弯四声降ˉ

5、′ˇ‵单韵母ɑoe玩累了,它们想回家,小朋友们你们知道它们住在哪吗?12341234上格中格下格上格中格下格第一线第二线第三线第四线ɑoe四线三格ɑ基本笔画:左半圆竖右弯2笔ɑo1笔e1笔

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