全氟辛烷磺酸对神经干细胞增殖和发育调控基因的影响

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时间:2019-03-04

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1、温州医学院硕士学位论文论文题目:全氟辛烷磺酸对神经干细胞增殖和发育调控基因的影响论文评阅人:答辩委员会主席:张达颖教授南昌大学第一附属医院答辩委员会成员:林丽娜教授温州医学院附属第一医院曹红教授温州医学院仁济学院论文答辩日期:2013年5月11号温少li医学院硕士学位论文IUlIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIMlullUlY2397534目录一、缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4二、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5三、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6四、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8五、材料和方法⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91、第一部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92、第二部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯133、第三部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18六、分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28七、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31八、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36九、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37十、综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38十一、学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48温州医学院硕士学位论文缩略词表(按字母顺序)4温州医学院硕士学位论文全氟辛烷

3、磺酸对神经干细胞增殖和发育调控基因的影响中文摘要目的观察PFOS对E15大鼠大脑皮层神经干细胞增殖和发育调控基因Notchl、Sox2、Star3和P21表达的影响,探讨PFOS影响皮层神经干细胞增殖机制。方法l、分离E15天SD大鼠皮层进行神经干细胞原代培养。以(卜2)*106/ml细胞密度接种,在含有2%B27,20ng/mlbFGE20ng/mlEGF的DMEM/F12的培养基中培养,并稳定传至第三代。用nestin细胞免疫化学染色法鉴定神经干细胞。2、将原代培养的神经干细胞随机分为5组:空白组(C组),溶剂对照组(D组),109MPFOS组(P1组),509MPFOS

4、组(P2组),100肛MPFOS组(P3组)。D组中加入DMSO,P1,P2,P3中各加入IOgM,50.M,lOOgMPFOS,放入培养箱中继续培养。3、增殖实验在培养20小时后,加入lOgM的EDU,继续培养4小时后进行EDU免疫荧光染色。4、培养24小时后采用荧光实时定量聚合酶链反应法(Real—TimePCR)检测各组样本中Stat3、Notchl、Sox2和P21mRNA的含量。结果1、与C组相比,D组与Pl组对神经干细胞增殖没有抑制作用,P2组、P3组对神经干细胞均产生抑制作用,差异有统计学意义(P

5、r3、Notchl、Sox2和P21mRNA含量均无明显改变,差异无统计学意义。结论全氟辛烷磺酸对神经干细胞增殖有抑制作用,但对调控基因Stat3、Notchl、Sox2和P21表达没有影响。关键词:全氟辛烷磺酸;神经干细胞;增殖;Stat3;Notchl;Sox2;P21TheEffectofPernuorooctanesulfonateExposureontheproliferationanddevelopmentalregulationofgeneofneuralstemcellsAbstractObjective:presentstudywastoobservethe

6、proliferationandexpressionofdevelopmentallyregulatedgeneofcerebralcortexneuralstemcellofE15rattreatedwithPFOS,andtoexplorethemechanismhowPFOSaffectsratcorticalneuralstemcelldevelopment.Methods:1.HarvesttheEl5SDratcorticalneuralstemcellsforprimaryculture,andseedcellswithdensityof(1.2)宰106/m“

7、nDMEM腰12medium,conmining2%B27,20ng/mlbFGFand20ng/mlEGF,thenpassintothethirdgeneration.Neuralstemcellswereidentificatedwithnestinimmunocytochemicalstaining.2.Primaryculturedneuralstemcellswererandomlydividedinto5groups:normalgroup(Cgroup),solventcontrolgr

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