最新ok第十三章尿液分析技术和相关仪器教学讲义ppt.ppt

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1、ok第十三章尿液分析技术和相关仪器②随着现代科学技术的发展，各种先进的检测技术，特别是电子技术及计算机的应用，不断提高尿液检查的自动化水平。同时由于计算机高速发展、血细胞分析仪和流式细胞仪的研制经验，尿沉渣全自动分析仪也相继问世，较好地解决了尿沉渣的自动化检查。①对肾和尿路疾患的诊断、鉴别诊断以及疾病的严重程度和预后的判断，有重要意义.(2)临床意义第一节尿液分析仪(1)发展历史20世纪40年代，出现了尿液干化学试剂带法，并成为利用尿液筛检健康人或患者的首选方法；20世纪70年代，第一台尿液化学分析仪

2、在问世，成为现代尿液分析的标志；20世纪80年代，逐渐将色谱和免疫技术用于干化学试纸中，生产出具有检测敏感性和特异性极高的单克隆抗体的试剂带；20世纪90年代以来，尿液分析仪自动化程度、性能得到迅猛发展。1990年，尿液分析仪就已达到全部国产化。(三)按自动化程度分类1．半自动尿液分析仪代表仪器：MIDITRON型(德国)，CLINITEK200型(美国)，URISCAN-S300型(韩国)，Uritest-l00型及Uritest-200型(国产)。检测项目主要包括尿8项、尿9项、尿10项或尿11项

3、。2．全自动尿液分析仪代表仪器：SUPERTRON型(德国)，ClinitekAtlas型(美国)。检测项目包括尿10项或尿11项。二、尿液分析仪工作原理(一)尿液分析仪的试剂带1．试剂带的结构①单项试剂带：以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥，作为试剂层，再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。尿液浸入试剂带后，与试剂发生反应，产生颜色变化。②多联试剂带：将多种项目试剂块集成在一个试剂带上。使用多联试剂带，浸入一次尿液可同时测定多个项目。第一层尼龙膜起

4、保护作用，防止大分子物质对反应的污染；第二层绒制层，它包括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏维生素C等干扰物质，试剂层含有试剂成分，主要与尿液中所测定物质发生化学反应，产生颜色变化；第三层是固定有试剂的吸水层，可使尿液均匀快速地浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。2．试剂带的反应原理(1)pH测定：采用pH指示剂原理，常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂，呈色范围从pH4.5~pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色，由此反映尿液pH。(2)尿蛋白质测定：利用pH指

5、示剂蛋白质误差的原理。由于各种指示剂都具有一定的pH变色范围，当溶液中存在蛋白质时，蛋白质离子可与带相反电荷的指示剂离子结合，引起指示剂的进一步电离，从而产生颜色变化，其颜色深浅与蛋白质的含量有关。(3)尿葡萄糖测定①基于葡萄糖氧化酶法原理，能特异地检出尿中的葡萄糖。利用葡萄糖在有氧和水的条件下，被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢。过氧化氢在过氧化酶催化作用下释放出新生态氧，使色原氧化而显色，其颜色深浅与尿中葡萄糖含量有关。②基于铜还原法的原理，能检测葡萄糖和其他还原性物质。铜还原法是基于尿中葡萄

6、糖和其他还原性物质能还原硫酸铜成氧化铜的原理而显色。目前采用铜还原法制成的试带为Clinitest试带，检测敏感性为2g/L。(4)尿酮体测定：采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。在碱性条件下，尿中酮体和亚硝基铁氰化钠反应而显色，其颜色深浅与酮体含量有关。(5)尿隐血测定：利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用，能催化过氧化氢释放出新生态氧，使色原氧化而显色，其颜色深浅与血红蛋白含量有关。(6)尿胆红素测定：采用重氮反应法原理。在酸性条件下，尿中直接胆红素能与重氮盐起偶联反应

7、形成重氮色素，颜色深浅与尿中胆红素量的多少有关。(7)尿胆原测定：采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。①Ehrlich醛法试带利用尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反应形成红褐色的复合物，颜色深浅与尿胆原含量有关。②重氮法试带利用尿胆原在强酸性条件下，与4-甲氧基苯重氮盐四氟化硼酸盐反应生成重氮色素，其颜色深浅与尿胆原含量有关。(8)尿亚硝酸盐测定：尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐的特性。在酸性条件下，使亚硝酸盐与芳香胺结合形成重氮化合物，再与苯喹啉结合产生

8、重氮色素，颜色变化与细菌数量不成比例，但阳性结果表明尿中细菌数量在105/ml以上。(9)尿白细胞测定：利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理；或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色，颜色深浅与粒细胞量的多少有关。(10)尿比密测定：基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。尿液中电解质离子可和聚甲乙烯顺丁烯二酸共聚体中的氢离子发生置换，换出的氢离子使溴麝香草酚蓝指示剂的颜色发生变化，颜