实验五肠杆菌科检验（二）.ppt

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1、实验五　肠杆菌科检验（二）西安医学院病原生物学与免疫学教研室目的要求掌握：血清凝集实验原理、方法。肥达试验的原理、结果分析及临床意义。熟悉：肥达反应的操作过程。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室原理：玻片凝集实验为定性试验，用已知抗体检测未知抗原。血清凝集实验Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容用已知伤寒伤寒沙门菌菌体O抗原和鞭毛H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌鞭毛H抗原的诊断菌液与受检者血清作试管或微孔板定量凝集试验，检测受检者血清中有

2、无相应抗体及其效价的试验。从而协助诊断伤寒或副伤寒。原理Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容1．待检血清、生理盐水、伤寒杆菌H、O及甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌H诊断菌液。2．微孔板、1ml刻度吸管、温箱、冰箱等。材料Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容方法血清稀释度1:201:401:801:1601:3201:640盐水0.25ml各管加入菌液0.25mlH①②③④⑤⑥⑦（对照）O①②③④⑤⑥⑦（对照）A①②③④⑤⑥⑦（对照）B①②③④⑤⑥⑦（对照）最终稀释度1:4

3、01:801:1601:3201:6401:1280振摇混匀后，置于56℃温箱孵育30分钟，再置于4℃冰箱10分钟后观察结果。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容结果H凝集：絮状，以疏松大团沉于管底O凝集：颗粒状，以坚实凝片沉于管底凝集程度的判定以“＋”、“－”号表示＋＋＋＋上清完全透明，细菌全部形成凝集块＋＋＋细菌绝大多数凝集，液体有轻度混浊＋＋50％细菌形成凝集，液体半澄清＋仅少数细菌凝集，液体比较混浊－液体均匀混浊，无凝集Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容结果血

4、清的凝集效价：以呈现＋＋凝集的血清最高稀释度作为标准。临床上均以两次标本（病程早期及恢复期）的血清效价有明显升高者为新近感染该病的指征。其中恢复期血清效价≥早期4倍有临床诊断意义。一般单份血清效价H≥1:160，O≥1:80,A≥1:80,B≥1:80以上，才有诊断伤寒或副伤寒的参考价值。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容举例12345O1:1601:3201:1601:401:40H1:3201:801:801:801:320PAH1:40-1:3201:801:320PBH-1:801:8

5、01:401:320伤寒伤寒早期副甲阴性回忆反应/疫苗接种Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验报告1记录血清凝集实验原理、结果并分析。2记录肥达实验的结果并分析其临床意义。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室ThankYou!