论文：果蔬中维生素C的提取和定量测定(2.doc

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4、鞭围繁罕疲果蔬中维生素C的提取和定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）【目的】1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。【原理】维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbicacid）。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。维生素C是不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。它分布很广，许多水果、蔬菜中的含量更为丰富。维生素C具有很强的还原性。还原型抗坏血酸能还原染料2,6—二氯酚靛酚（dichloro-phenol-in

5、dophenol，简称DCIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6—二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。【试剂和器材】一、试剂2%草酸溶液：草酸2g溶于100mL蒸馏水中。1%草酸溶液：草酸1g溶于100mL蒸馏水中。标准抗坏血

6、酸溶液(0.1mg/mL)：准确称取50.0mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至500mL，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。0.1%2,6—二氯酚靛酚溶液：250mg2,6—二氯酚靛酚溶于150mL含有52mgNaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏(4℃)，约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。二、材料：水果、蔬菜三、器材5研钵，组织匀浆器，吸量管，抽滤设备，离心机，滤纸，容量瓶，滴定管，锥形瓶。【操作方法】一、提取水洗干净待测的新鲜蔬菜或水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20

7、g，加入10～20mL2%草酸，研磨成浆状，抽滤，合并滤液，滤液总体积定容至50mL。或者研磨后以2%草酸洗涤离心(4000r/min，10min)2~3次，合并上清液于50mL容量瓶中，定容至刻度。二、标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置50mL锥形瓶中，加9mL1%草酸，以0.1%2,6—二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15秒不褪色，即达终点；取10mL1%草酸作空白对照，按以上方法滴定。由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸。三、样品滴定准确吸取滤液两份，每份10mL,分别放入2个锥形瓶内，滴定方法同前。另取10mL1%