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1、资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。电喷雾质谱在非共价蛋白复合物研究中的应用1.前言质谱作为一种分析方法,长期以来一直用于小分子化合物的结构分析。直到80年代末电喷雾电离质谱(electrosprayionizationmassspectrometry,ESI-MS)和基体辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrixassistedlaserdesorptionionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)两种”软电离(softionization)”质谱的出现,才将质谱的分析范围扩大到生物大分子的结
2、构分析。在生物界,生物分子的非共价特殊作用是分子识别的基础。因此,非共价复合物的检验在生物学上是一个重要的研究课题。虽然MALDI-TOF的较高灵敏度和Mr表征范围对于测定生物大分子物质优于ESI质谱,可是它在检测非共价复合物的应用上却受到供试品制备条件的限制[1]刘益华,徐俊福.基质辅助激光解吸飞行时间质谱在生物大分子中的应用.中国生化药物杂志.,25(3):192-193。而ESI-MS对蛋白质复合物的研究在样品用量少、快速的情况下可得到可靠的数据和较多的信息。由于其具有灵敏度高、快速和质量精确度高的优点,复合物的化学计量比能够很容易地推导出。经过改变源的锥孔(cone)电压、
3、改变溶液的pH值和进样毛细管温度,能够比较不同化合物与蛋白质的亲合力的大小[2]ParmanikBN,BartnerPL,MirzaUA,etal.Electrosprayionizationmassspectrometryforthestudyofnon-covalentcomplexes:anemergingtechnology[J].JMassSpectrom,1998,33(10):911-920。对非共价键复合物进行部分酶解或完全酶解,还能够确定小分子与蛋白质的结合位点[3]MillarAL,NicholasAC,JacksonNAC,etal.Rapidanalys
4、isofepitope-paratopeinteractionsbetweenHIV-1anda17-amino-acidneutralizingmicroantibodybyelectrosprayionizationmassspectrometry[J].EurJBiochem,1998,258(1):164-169.。可见,ESI-MS可广泛用于研究蛋白质非共价键复合物。到当前为止,用ESI-MS观察到的不同的非共资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。价键复合物包括蛋白质-蛋白质［4］OgorzaleklooRR,GoodlettDR,SmithR
5、D,etal.ObservationofanoncovalentribonucleaseS-proteinS-peptidecomplexbyelectrosprayionizationmassspectrometry[J],JAMChemSoc,蛋白质-配体［］,1993,115(10):4391-43925RobinsonCV,ChungEW,KragelendBB,etal.Probingthenatureofnoncovalentinteractionbymassspectrometry.Astudyofprotein-CoAligandbindingandassembly
6、[J].JAmChemSoc蛋白质-寡核苷酸［］Light-WahlKJ,,1996,118(36):8646-8653,6SpringerDL,WingerBE,etal.Observationofasmalloligonucleotideduplexbyelectrosprayionizationmassspectrometry[J].JAmChemSoc,1993,115(2):803-804.和蛋白质-双链［］ChengXH,MorinPE,HarmsAC,DNA7etal.Massspectrometrycharacterizationofsequence-specifi
7、ccomplexesofDNAandtranscriptionfactorPU.1DNAbindingdomain[J].Analbiochem及蛋白质-金属离子等［］,1996,239(1):35-40.8HuP,LooJA.Gas-phasecoordinationpropertiesofZn2+,Cu2+,Ni2+,andCo2+withhistidine-containingpeptides[J].JAMChemSoc。,1995,117(45):11314-
