大鼠股骨骨折愈合影响论文.doc

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1、大鼠股骨骨折愈合影响论文他汀类药物是目前临床用于降低胆固醇、预防心血管疾病的常用药物，其功能机制是抑制羟甲基戊二酰辅酶A还原酶，从而降低肝脏胆固醇的合成.Mundy等［1］的探究第一次表明，他汀类药物具有激活成骨细胞、促进骨合成代谢功能，这一发现为临床治疗骨质疏松和骨折愈合提供了新的思路，成为目前对于探究骨代谢新药的一个热点新问题.为了进一步探索该药物的成骨功能及其机制，我们通过建立大鼠骨折模型［2］的方法，进行了该药物对大鼠骨折愈合影响的初步实验探究.1材料和方法1.1动物模型制备和分组健康12周龄雌性SD大

2、鼠20只，体质量(238±22)g.以10g/L戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉成功后，将大鼠仰卧于手术台上，常规去毛、备皮、碘伏消毒，于右大腿中段外侧取纵形皮肤切口，长约2cm，沿股外侧肌间隙钝性分离进入达股骨干，固定股骨，在骨干中1/3段用线锯锯断成横行骨折，此过程中注重保护坐骨神经和肌肉组织，然后，以直径约1.5mm的克氏针逆行穿入骨折近端且从后侧股骨大粗隆穿出，复位骨折后再将其顺行穿入骨折远段髓腔，生理盐水冲洗，逐层关闭伤口.然后，将动物随机分成两组（每组10只）摘要：给药组（Fractur

3、e+Simvastatin）以5mg/kg隔日灌胃给辛伐他汀药物一次；对照组（Fracture+Vehicle）以同样方法给和等量的生理盐水.所有的受试大鼠在术后6wk处死，并且处死前第10日和第4日分别皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素行双荧光标记，处死后的大鼠取右侧股骨标本.1.2观察指标1.2.1CR摄片将大鼠完整右侧股骨干骨折标本经计算机X线摄相仪（CR）摄片（距离摘要：90cm、电压摘要：40KV、电流摘要：3.2mA%26#12539;s），观察大鼠股骨骨折骨痂的连续性和测量骨痂最大直径.5学海无涯1.2

4、.2密度测定应用NorlandXR36双能X线骨密度测量仪（DEXA，美国），采用小物体扫描模式，准确度0.01%，扫描速度60mm/s,分辨率（resolution）1.0mm×1.0mm，扫描宽度5.0cm的参数值，进行右侧股骨中1／3段（骨痂）骨密度的测量.测量时，将固定骨折部位的克氏针拔除，其范围包含了以每个骨折部位为中心的无克氏针矩形区域，即摘要：感性趣区.为了评价精确度，随机选取一例，在位置不变的情况下，连续测量BMD各5次，精确度用变异系数CV表示（CV＝5%）.1.2.3形态学染色将骨折骨痂标本

5、，置入40g/L多聚甲醛和0.6mol/L戊二醛混合缓冲固定液中（pH=7.2～7.4），在4℃条件下固定24～48h，再经0.3mol/LEDTA2Na缓冲液（pH=7.4，4℃）脱钙，隔5～7h更换脱钙液，经过3～5wk后，经鉴定，脱钙完全.然后,梯度乙醇脱水,二甲苯透明，纵向石蜡包埋,5μm连续切片，HE染色，透明后中性树胶封片，Olympus显微镜下作普通光镜观察.1.2.4骨组织形态计量学测定将骨痂标本固定后逐级脱水，浸入3∶7的甲基丙烯酸甲酯中24h［真空负压651.88mmHg(1mmHg=0.1

6、33kPa),1次］，然后以半聚合甲基丙烯酸甲酯包埋制成实验标本.采用JungK硬组织切片机，每个标本连续切6张10μm和4张5μm厚的不脱钙骨切片，其中5μm薄片采用甲苯胺蓝染色用于普通光学显微镜下观察和测量，10μm厚片用于荧光显微镜下观察测量.统计学处理摘要：实验数据建立EXCEL数据库，资料用SPSS11.0来处理，采用成组t检验.数据用x±s表示，以P＜0.05表示具有统计学意义.2结果2.1CR摄片观察观察大鼠离体右侧股骨干CR片发现，对照组和给药组大鼠骨折端均有连续性骨痂包绕，骨折线模糊或消失，骨

7、痂量没有明显的差别，未发现内固定克氏针松动现象，但是，给药组有3只股骨干的骨折骨痂塑形明显好于对照组；测量所得两组骨痂最大直径宽度，对照组摘要：（4.35±0.48）mm，给药组摘要：（4.43±0.39）mm，经统计学分析差异无显著性（P＞0.05）.2.2骨密度测量骨痂骨密度测量结果(g/cm2)显示，对照组摘要：0.1208±0.0101，给药组摘要：0.1292±0.0075，经统计学分析差异有显著性（P＜0.05）.5学海无涯2.3组织学观察给药组和对照组比较骨痂中均主要以骨性骨痂为主，软骨骨痂少见或

8、基本消失，小梁骨成熟度较高，成骨细胞功能活跃，破骨细胞少见，不典型，骨小梁粗细均匀一致，间距无明显增宽，二者比较无明显的组织形态学差异.2.4骨组织形态计量学测量对照组及给药组的BV/TV（%），Tb.Th（μm），Tb.N（#/mm），Tb.Sp（μm）分别是31±5，40±6；157±48，136±38；3.0±0.4，3.8±0.5；351±25，314±25.其中，两组Tb.T