背根节初级感觉神经元敏感性探讨论文.doc

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1、背根节初级感觉神经元敏感性探讨论文【关键词】温度敏感性；膜片钳术；神经节,脊；神经元【Abstract】AIM:Tostudytheeffectsoftemperatureonmediumdiameterprimarysensoryneuronsinratdorsalrootganglion(DRG).METHODS:WholecellpatchclamprecordingwasperformedonmediumdiameterDRGneuronsfreshlyisolatedfromratsforobservingthefiringc

2、haracteristicsbytemperaturegradientstimulation.RESULTS:AccordingtothefiringcharacteristicsoftheprimarysensorymediumneuronstothetemperaturechangesinratDRG,therewere2classesofcells:InclassⅠ,themediumneuronwastemperaturesensitiveneuron.Allornoneactionpotentialscouldbegenera

3、tedandthenumberofspikesandthefrequencydecreasedwithincreaseofthetemperature,andviceversa.Thecoldsensitiveneuronwasvoltagedependent.InclassⅡ,themediumneuronwastemperatureinsensitiveneuron.Itonlyhadsingleactionpotentialwithincreaseordecreaseofthetemperature,andtheamplitude

4、ofthesingleactionpotentialdecreasedwithincreaseofthetemperature.CONCLUSION:ThetwoclassesofratDRGmediumneuronshavedifferentthermosensitivity.【Keywords】thermosensitivity;patchclamptechniques;ganglia,spinal;neurons【摘要】目的：观察大鼠背根节(DRG)中型神经元的温度敏感性.方法：在新鲜分散的大鼠背根节中型神经元运用全细胞膜片钳技术

5、，观察给予不同温度梯度刺激下引起细胞放电的特征.结果：根据大鼠背根节中型神经元在不同温度梯度刺激下的放电特征可将它们区分为两类温度敏感神经元.Ⅰ类神经元的温度敏感性与冷温度变化密切相关，随着温度的升高而引发的逐渐增强的膜电位超级化可引发频率由高到低的动作电位.随着温度的降低神经元又表现出频率由低到高的动作电位变化.动作电位的幅值一致，符合“全或无”定律.该类神经元具有电压依赖性.Ⅱ4学海无涯类神经元的兴奋性与温度变化的关系不明显，随着温度升高或降低，神经元只出现一个动作电位，其频率没有变化，仅仅表现在随温度升高，动作电位的幅值降低，温度

6、降低后，其幅值又恢复.结论：大鼠DRG两类神经元在温度变化一致的情况下各具不同的冷温度敏感性.【关键词】温度敏感性；膜片钳术；神经节,脊；神经元0引言为了生存和适应自然界各种变化,温度感受是动物最基本的生物行为.动物通过特殊的温度感受器来感知冷和热.依据细胞所具有不同的冷热温度感受器，可简单将其温度敏感性分为三类.这种分类在神经系统具有一定的普遍性［1-2］.背根节(dorsalrootganglion,DRG)是外周感受信号传向中枢所经的第一站，节内细胞复杂多样，其中中、小型细胞传递的信息和冷热觉的关系密切.目前关于背根节小细胞和冷温

7、度敏感性关系的研究报道较多［3-5］，但有关中型细胞和温度感受及传递关系的研究较少.本研究采用全细胞膜片钳方法初步探讨背根节上中型神经元的温度敏感性，旨在深入了解初级感觉神经元在温度感受与传递中的作用机制.1材料和方法1.1材料SD大鼠体质量50~60g，雌雄不拘，由第四军医大学实验动物中心提供；胰蛋白酶(Ⅰ型)，胶原酶(Ⅲ型)，MgATP均购自美国Sigma公司；Axon200A放大器，美国Axon公司；半导体温度计(7151型)，上海医用仪表厂.1.2方法急性分离DRG细胞后，进行全细胞膜片钳记录.实验在40个DRG细胞上进行记录，

8、静息膜电位为：(-52.0±3.2)mV．1.2.1DRG细胞的制备SD大鼠在戊巴比妥钠(40mg/kg,ip)麻醉下，迅速取出胸腰段DRG，置于氧饱和的RPMI1640液中，仔细剪除多余的神经纤维后将神经