榛子壳多糖的提取纯化及应用研究.docx

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1、榛子壳多糖的提取纯化及应用研究研究以榛子壳为原料,采用热水浸提法和超声辅助浸提法制备榛子壳粗多糖,利用酶+Sevag法脱蛋白、H2O2脱色,利用大孔树脂S-8脱盐,将纯化后的多糖与Vc对比,进行DPPH·、·OH以及O2-·三种自由基的清除作用的研究,通过验证榛子壳总多糖结构及分析榛子壳的组成成分,最后在单因素实验的基础上,利用正交实验得出榛子壳多糖红茶复合饮料的最佳配方,确定该饮料的制作工艺,主要研究内容和结果如下:(1)采用热水浸提法和超声辅助浸提法这两种浸提方法。热水浸提通过采取响应曲面分析法优化分析浸提榛子壳多糖的最佳浸提工艺条

2、件为:浸提时间为1.6h、水固比为12:1mL·g-1、浸提温度81℃,在此条件下进行平行验证实验3次,得到榛子壳多糖提取率平均值是3.03mg·g-1。超声辅助浸提法通过采取响应曲面法进行分析得出如下的最佳浸提工艺条件:超声功率为200w、超声时间为36min、超声温度是60℃、水固比12:1mL·f1,在此条件平行验证实验3次,榛子壳多糖提取率平均值是7.99mg·g-1。超声辅助浸提法相比于常规的热水浸提法,其多糖提取率明显提高2倍以上。(2)对超声辅助浸提得到的榛子壳粗多糖进行纯化,通过横向比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶

3、法以及酶+Sevag法,最终选择酶+Sevag法脱榛子壳多糖中蛋白,通过采取正交实验明确最佳除蛋白条件为:酶添加量1.5%,酶解温度60℃,酶解时间1.5h,pH值6.0。采用双氧水法(H202)脱除榛子壳多糖中色素,通过采取正交实验明确最佳脱色参数为:H202体积分数15%,溶液pH8,脱色时间2h,脱色温度50℃。采用S-8大孔树脂除去榛子壳多糖中小分子成分,动态吸附实验中,最佳条件为:上样液pH7,上样体积量10mL,流动速度控制1mL·min-1,在该条件下吸附率可达83.31%,动态洗脱实验中,洗脱溶液最佳pH值为9,在该条件

4、下解吸率为32.68%。(3)通过对多糖纯化产品清除DPPH·、·OH和02-·三个方面测定,研究表明,纯化后的榛子壳多糖纯化品具有抗氧化能力,但其清除能力较Vc低。(4)经紫外光谱分析得出本实验所浸提并纯化得到的榛子壳多糖纯化物中无蛋白质和核酸残留。在红外光谱图中确认出榛子壳中浸提并纯化的多糖物质中含有多糖的一些特征吸收峰,初步确定本实验浸提并纯化得到的物质为含有多糖类物质。通过高效液相色谱测定榛子壳中浸提并纯化得到的多糖可能含有Man、Rha、Glc、Gal、Xyl、Ara等六种成分,质量分数分别为24.28%、8.58%、5.11

5、%、12.32%、17.13%、14.21%。(5)对榛子壳多糖红茶复合饮料的配方进行了优置,以该饮料感官打分为考察指标,通过正交实验判断榛子壳多糖、柠檬酸、维生素C以及蜂蜜等成分添加量这四个影响因子对饮品感官的程度比较为:柠檬酸添加量>蜂蜜添加量>维生素C添加量>榛子壳多糖浸提液添加量。此时得到该最优配方的添加量分别为榛子壳多糖0.5%,柠檬酸0.15%,维生素C0.15%,蜂蜜0.5%。