生化试剂参数.ppt

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1、生化试剂各机型参数确定目录生化试剂主要参数及意义生化试剂其他参数及意义各机型生化分析仪概括介绍各机型参数特点生化试剂主要参数及意义生化试剂说明书中各参数（例：脂肪酶）项目名称方法类型反应方向测定波长测定温度样本体积试剂量分析时间校正方法生化试剂主要参数及意义项目名称(testname)：常以项目的英文缩写来设置。方法类型(assay/Method)（适用于仪器的方法）：方法类型主要分为：终点法和动力学法终点法一点终点法：样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度，如血糖氧化酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。两点终点法：（又称固定时间法）样本与试剂混

2、匀一定时间后先读取吸光度A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，计算吸光度差值与标准比较求得结果。如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。生化试剂主要参数及意义动力学法一级动力学法：（两点速率法）样本与试剂反应不断消耗反应物，反应速度不断减小，吸光度变化不断减小，在特定时间段内进行监测，该时间段内吸光度升高或降低与样本浓度成正比，如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）样本与试剂反应，反应物可匀速生成某个产物，如NADH，在特定波长下吸光度均匀的增大或减小，增大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。生化试剂主

3、要参数及意义一级动力学法：（两点速率法）生化试剂主要参数及意义零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）生化试剂主要参数及意义反应方向(responsedirection)正向反应（UP/INC/+）：吸光度增加。负向反应（DOWN/DEC/-）：吸光度下降。测定温度30℃、37℃、25℃样本体积（samplevolum）一般为2-35μl，以0.1μl步进。试剂量（regengtvolum）一般为20-300μl，以1μl步进。不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同，样本与试剂可根据比例进行增大或减少。生化试剂主要参数及意义测定波长（wavelen

4、gth）：不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。主波长（mainwavelength/primarywavelength）根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。副波长（次波长subwavelength/secondwavelength）可不选择设定。副波长可消除样本溶血，血清浑浊的干扰影响，副波长与主波长越接近越好。检测时吸光度值为主波长的吸光度减去副波长的吸光度。生化试剂主要参数及意义分析时间：孵育时间（incubatetime）一点终点法的孵育时间是指样本与试剂开始到反应终点的时间；两点终点法是指第一个吸光度反应点开始到第二

5、个吸光度点为止时间。一般为5min。延迟时间（delaytime）加入第二反应试剂后到第一个吸光度监测点开始的时间。即样本与反应试剂（第二试剂）混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。单试剂一般设置为30s，双底物反应或酶类反应一般设置为1-3min。连续监测时间（continuousmonitoringtime）在延迟时间后的零级反应开始，监测至少4个点（3个吸光度变化值），一般为1-2min。生化试剂主要参数及意义校正方法（CalibrationType）：可采用标准液（校准液）定标方式或理论K值方式获取标准曲线。线性定标（Linear/AB）：两点定

6、标，标准曲线呈直线。非线性定标（Spline/4AB/polygonal）：多点定标，标准曲线近似于直线。理论K值（Factor/MB）：多用于连续监测法测定酶活时，无需定标曲线，根据摩尔消光系数计算得到结果。106×VF=——————ɛ×v×L生化试剂主要参数及意义V：反应体系总体积（ml）；v：样本体积（ml）ɛ：摩尔消光系数（cm2/mol）L：比色杯光径（cm）；106：将mol换算为μmol生化试剂其他参数及意义试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(ODLimt)底物耗尽限额(substrateexhaustlimit)试剂吸光度线性范围(Lin

7、earity）试剂线性范围（TechnicalLimit）前区检查限(ProzoneCheckLimt)方程式（Fomular）小数位（DecimalPlaces）双份界限（DuplicateLimit）敏感性界限(SensitivityLimit)第一标准吸光度界限(S1Abs.limt)反应过程吸光度界限(AbsorbanceLimit)生化试剂其他参数及意义试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(ODLimt)常用规定波长及光径下的吸光度值表示。终点法常在0点读数，连续监测法常以反应监测起始点来判读该吸光度值。可用于判断试剂质量。检测试剂空白时，若超过

8、此参数的限值，则提示试剂可能失效。底物耗尽限额(substrate