临床生化检验与生化试剂

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1、一临床检验与临床化学临床检验临床检验又称实验诊断学，即通过实验室的各种检查方法，包括感官检查、理学检查、化学检查，显微镜检查以及自动化仪器检查等，对病人的血液、体液、分泌物和排泄物等标本进行检查、分析，以获得病原、病理变化及脏器功能状态等资料。1、临床血液学检验2、体液检验3、临床化学检验4、临床免疫学检验5、微生物学检验6、分子生物学检验临床检验在医学中的作用为准确诊断、及时治疗提供依据：如：肾脏有实质性损伤：尿液中出现蛋白、细胞管型贫血(症)：血中红细胞和血红蛋白量减少白血病：血象和骨髓象为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据：在疾病过程中，血液、体液、分泌物和排泄物也会随之发

2、生相应的变化为预防疾病提供资料如血象和肿瘤细胞学的普查等临床生化检验临床生物化学，即采用生物化学分析方法，对临床标本进行定性或定量分析，以辅助临床诊断；临床生化常用的检测方法：化学比色法：待测物经特定的化学反应生成的一定的产物，在特定波长光照下具有吸收峰，待测物的浓度与吸光度成正比，从而对物质进行定量检测方法免疫比浊法：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，浊度亦增加。然后检测透（散）射光强度，即透（散）射比浊离子选择性电极电位法：通过检测电极表面电位的改变，比较测定电极与参比电极表面电位变化的差值大小来计

3、算样本中离子的含量。如，钾、钠、氯的测定电泳法：直流电场中，带电粒子向相反电极移动，血清中的蛋白质为双性离子，在碱性环境中带负电荷，在电场中向正极移动。不同蛋白具有不同大小、分子量和电荷，带电荷多，分子量小则泳动快，反之则慢，从而将不同蛋白分离。如:血清蛋白电泳二全自动生化分析仪自动生化分析仪：集添加试剂、注入样本、比色、计算、出报告等功能于一体，用于检测生化项目的计算机控制的自动化仪器。国内使用的主要品牌：日本：日立（HITACHI）7020，7060，7080，7170，7180，7600奥林帕斯（OLYMPUS），AU400,640,800,1000，2700,5400岛津

4、（SHIMADZU），CL7200,8000东芝（TOSHIBA），TBA40FR,120FR希森美康（SYSMEX）；180京都1024魅力系列美国：雅培（ABBOTT），AerosetC8000，2000德灵（杜邦）（DADEBEHRING），AR,RXL,XPAND贝克曼库尔特（BECKMANCOULTER），CX4,5,7,9,LX20德国：拜尔（BAYER）ADVIA1650,2400；罗氏（ROCHE）利霸欧宝S-600；康宁560国内：深圳迈瑞，沈阳东软、南京英诺华,上海科华其他：荷兰的威图、意大利的BT2000/3000、西班牙的A30等。光学光谱区远紫外近紫外可见

5、近红外中红外远红外10nm~200nm200nm~380nm380nm~780nm780nm~2.5m2.5m~50m50m~300m自动生化分析仪应用原理：分光光度法分光光度技术是利用物质的分子对光的选择性吸收作用对物质进行定性或定量分析的技术。分光光度法是光谱分析技术中最常用的一种，应用最多的是紫外－可见光分光光度法光吸收基本定律:Lambert-Beer定律Lambert－Beer定律时讨论溶液吸光度同溶液浓度和溶液层厚度之间关系的基本定律，该定律时分光分析的理论基础。K为比例常数，C为溶液浓度（当液层厚度为cm，浓度单位为mol/L时，吸光系数K称为摩尔吸光系数ε

6、。ε的意义是：当液层厚度为1cm，物质浓度为1mol/L时在特定波长下的吸光度值。ε是物质的特征性常数）Lambert-Beer定律适用于可见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体A=lg(I0/It)=kbc吸光度介质（溶液层）厚度(cm)——光径吸光度与浓度的关系A=bc吸光度0.00光源检测器吸光度0.22光源检测器b吸光度0.42光源检测器b一般对一个新的试剂来说，总是先做标准品定标（校准），再进行相应的样本检测。多点定标和一点定标：通过多个浓度有一定梯度的标准液来定标（校准），规范出标准曲线的一定的趋势，以此来得到浓度与吸光度的函数。多点定标大多用于非线性校准，得到的标准

7、曲线一般为二次函数的抛物线类型。只用一个标准品来定标，得到的函数为Y（浓度）=AX(吸光度)+B，是一条简单的直线。生化分析基本测定方法连续监测法（速率法）：即连续监测反应过程，按产物的生成或底物的消耗的速度(△A/min)进行定量分析的方法，读数点必须在等速区对低浓度的样本，它的吸光度随时间变化的慢（速率低），而高浓度样本，它的吸光度随时间的快（速率高）。在反应时间进程曲线上为反应呈恒速区段(斜率保持不变)，常用于酶活性线性反应期测定或以酶为工具测底物（代谢物）的浓