临床生化检验

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1、临床生化检验常用的分析技术:光谱技术、电泳技术、电化学分析技术、离子层析分离技术、分子生物学技术临床生化检验常用的分析技术光谱分析技术:在一定条件下,相同物质的发射和吸收光谱与该物质呈正比,因此可对该物质进行定性、定量分析。光谱分析技术光谱分析技术分类:发射光谱(火焰、荧光、原子发射光谱法)、吸收光谱(紫外、可见、原子吸收分光光度法、透射比浊法)、光谱分析技术分类散射光谱(散射比浊法)比色杯:由无色透明,耐腐蚀,耐酸碱的玻璃或石英组成比色杯玻璃杯:可见光;石英杯石英杯:紫外光玻璃杯石英杯光径10cm,常用为常用为:1.0cm光径分光

2、光度计的光源:可见光紫外光:宛灯,波长200-340nm分光光度计的光源可见光:鹤灯波长360-1000nm;紫外光可见光紫外光常用抗凝剂:常用抗凝剂:草酸钾一氟化钠:是-血糖测定标本常用的抗凝剂,25°C可稳定24小时,4°C可稳定48小时肝素:常用于血气分析和部分生化项日的测定lg/L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液EDTA:适用于一般血液学检测枸椽酸钠:浅蓝(浓度3.2%・3.8%比例1:9适用于凝血)黑色(浓度3.2%比例1:4适用于血沉)防腐剂:浓盐酸:0.5-lml浓盐酸/100ml尿液,适用于24小时儿茶酚胺、秀草

3、扁桃酸、17■疑皮质类固醇、17■酮类固醇等检测防腐剂甲苯:丿永液表血形成薄膜,防止细菌繁殖。l・2ml/100ml丿永液,适用于肌酹、尿糖、蛋口质、丙酮等生化项目测定冰醋酸:5-10ml/24小时尿,适用于尿醛固酮测定麝香草酚:抑制细菌生长,适用于钾、钠、氯、钙、氨基酸、糖、尿胆原、胆红素的测定特殊标本采集:临床医生采3个于无菌试管中,第一个做细菌检查细菌检查,第二个做生化检查生化检查,第三个做细胞计数特殊标本采集细菌检杳生化检查细胞计数恒定系统课売与被测物质浓度无关,与干扰物浓度相关;比例系统误差比例系统谋差的绝对量与被测物浓度

4、呈正比恒定系统课差比例系统误差影响检验结杲的生物学因素:影响检验结杲的生物学因素婴儿CK、GGT、AST升高,胆-红素生理升高但不很少高于85umol/L,血脂低,血钾可达7mmol/L,碱性磷酸酶活性高。新生儿血糖浓度低新生儿老年人肾浓缩能力、肌酹清除率、肾糖阈下降,血尿素升高老年人干燥剂:CaC12吸收水和酒精;CaO吸收水和酸;硅胶硅胶只吸收水(蓝色有效,粉红色无效)干燥剂硅胶玻璃仪黠清洁剂配置:重锯酸钾50g,浓硫酸900ml,水100ml红棕色有效,变绿效力降低,黑色不可使用玻璃仪器清洁剂配置参考方法钾钠白蛋白总蛋白火焰光

5、度火焰光度免疫化学凯氏定氮常规方法火焰光度法(767nm深红)、离子选择电极火焰光度法(589nm黄色)、离子选择电极澳甲酚绿双缩月尿实验室方法评估指标和实验:指标包括:实验室方法评估指标和实验:指标包括:精密度、准确度、检测能力评佔试验:重复性试验、冋收实验、干扰试验,方法比较试验评估试验实验室全面质控的内容:1有专人负责全面质控工作;2对工作人员进行医徳医风教育和业务培训,普及质控知识;实验室全面质控的内容3科学的管理和严格的规章制度是质控方案可以试试的保证;4有标准化的操作规程;5有分析前和分析厉的质量控制程序;6仪器量器的定

6、期鉴定,校正和正确使用;7实验用水、试剂、质控品及校准品的质量符合要求;8釆用的各种测定方法的准确度,精密度等技术性能良好;9选择合适的室内质控方法,常规开展室内质控,对失控结果及时釆取和应的处理措施;10参加实验室室间的质屋评价活动或能力比对检验,认真分析冋报结果,对失控的项目及时检查原因,釆収相应的改正措施CILA88的PT方案主要内容要求方案主要内容要求:每年至少进行3次PT调查,每次调查至少包括5个不同的指控标本,即在一年的时间内对任意一项目至少可得15个测定,对某个特定的分析结果如落于规定限内则判断为接受结果,对某一个接受

7、结果,不再进行优略分级,S1和S2均应>80,否则判断为不满意,如果在S1或S2连续2次不满意或有2次以上不满意,判断为失败。方法评价试验与实验误差类型的关系:方法评价试验与实验误差类型的关系:分析误差的类型随机误差恒定误羌比例谋羞评价试验初步试验批内重复性试验干扰试验回收试验最后试验日间重复试验方法比较试验精密度:表示测定结果屮随机误差大小程度的指标精密度准确度:使用已经确认的方法测泄结果作为标准真值,看测沱值与真值的接近程度,用偏差系数表示,准确度主要受系统误差支配(反比)准确度特界度和干扰:非待测物质对待测物质的影响。特界度和

8、干扰检测能力:检测的灵敏度,测定检测方法的线性范围检测能力回收试验:□的是检测候选方法的比例系统误差回收试验质控:1.1个质控超过3s,存在随机误差;2.2个连续质控超过2s,存在系统误差;3.同批2个结果超过4s,存在随机误差;质控

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