实验 混合色素溶液中柠檬黄和日落黄浓度 的测定 双组分分光.ppt

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1、实验混合色素溶液中柠檬黄和日落黄浓度的测定双组分分光光度分析法231实验原理实验内容实验目的4实验准备567实验步骤实验数据及处理思考题1.实验目的1、了解吸光度的加和性，掌握用分光光度法测定混合组分的原理及方法。2、进一步熟悉UNICO2100型分光光度计的使用方法。2.实验原理试液中含有多种吸光物质时，如果混合液中各组分最大吸收峰重叠不严重，在一定条件下可以用分光光度法同时测定而不需分离。例如，在本实验的乙酸铵介质中柠檬黄和日落黄色素的吸收曲线相互重叠，如下图所示：图在乙酸铵介质中柠檬黄与日落黄色素的吸收曲线可以根据吸光度的加和性原理，分别测定柠檬黄和日落黄在最大吸收波长42

2、6nm和482nm处的吸光度。然后用解联立方程式的方法，求出试液中柠檬黄与日落黄的含量。A426nm(总)=A426nm(柠檬黄)+A426nm(日落黄)(1)A482nm(总)=A482nm(柠檬黄)+A482nm(日落黄)(2)A=ɛbc(3)3.实验内容1．通过测定，计算出柠檬黄和日落黄在最大吸收波长426nm和482nm处的摩尔吸光系数。2.测定求出混合液中柠檬黄与日落黄的浓度。4.实验准备1、两人一组，借7只50ml容量瓶和2支5ml刻度吸管。2、每组交1只50ml容量瓶（洗净、贴标签），发未知样。（以5ml计）3、每组准备2只100ml烧杯，洗净、擦干，盛柠檬黄与日落

3、黄标准溶液。5.实验步骤1、柠檬黄在426nm和482nm处ɛ的测定分别吸取1，3，5ml柠檬黄储备溶液(0.2g·L-1)于三只50mL容量瓶中，用1.5g·L-1乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，测定各浓度的柠檬黄溶液于426nm和482nm处的吸光度，按式ε=A/bc=A/c（b=1cm）分别计算不同浓度柠檬黄溶液在426nm和482nm处的摩尔吸光系数ɛ，将接近数据取平均值。2、日落黄在426nm和482nm处ɛ的测定用日落黄储备溶液(0.2g·L-1)代替柠檬黄，用上述方法测定各浓度日落黄溶液于426nm和482nm处的吸光度，计算其在此两波

4、长处的摩尔吸光系数ɛ。3、混合溶液中柠檬黄和日落黄浓度的测定用50ml容量瓶向教师领取未知浓度的混合溶液一份，用1.5g·L-1乙酸铵溶液稀释至刻度摇匀，并用试剂空白为参比，在1cm比色皿内分别测出在426nm和482nm处的吸光度。重复测定三次，取平均值，然后列出二元联立方程，即可求出混合液中柠檬黄和日落黄的浓度。6.实验数据及处理混合液中各组分浓度计算摩尔吸光系数：ελ=Aλ/c和b=1cm代入式（1）和（2）式得式中：ε为摩尔吸光系数，可分别用已知浓度的柠檬黄和日落黄在波长为426nm和482nm时的标准曲线求得（标准曲线的斜率即为ε）。实验数据记录格式：溶液柠檬黄日落黄未

5、知溶液体积1.003.005.001.003.005.005.00溶液浓度xA426nmε426nmε426nmA482nmε482nmε482nm注意事项：采用累加法测定试样在不同λ时的ε时,只能应用于待测组分为有色物质或加入显色试剂次序无关的显色反应，若显色反应与加入试剂的次序有关，则应作标准系列法。7.思考题1、双组分分光光度分析的依据是什么？2、本实验中配制溶液时为何加入乙酸铵？3、如何测定不同波长处溶液的摩尔吸光系数？4、如何进行双组分分光光度分析？