小鼠脾细胞悬液制备复习过程.doc

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1、精品好文档，推荐学习交流小鼠脾细胞悬液制备一、小鼠眼球取血（眼静脉取血）二、小鼠脾细胞悬液的制备： 1．小鼠颈椎脱臼处死，75%乙醇浸泡3分钟，取出小鼠置于无菌纸上，左腹侧朝上；2．在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏；3．在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏。放入盛有5mlHanks液的培养皿中；4．A：梳刮法：脾脏可用镊子轻轻梳刮，避免将脾脏弄成碎片，将细胞悬液吸入离心管中，自然沉降5分钟，将悬液移至另一离心管中，弃去较大的组织块，离心沉淀细胞；B：钢网研磨

2、法：将脾脏放置不锈钢网（100或200目）上，用注射器针芯轻轻研压脾脏，获细胞悬液；C：酶消化法：将脾脏用镊子夹碎，加入400u/ml胶原酶（III型）5ml/只脾脏，37度消化20分钟，用尼龙网过滤，得到单细胞悬液。 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢4精品好文档，推荐学习交流5、脾脏研磨：轻轻研压（顺同一方向），用吸管吸取脾细胞悬液，放入试管中。6、镜下细胞计数：40倍镜头，观察脾细胞。7、试取胸腺注：一般6-8周龄小鼠，根据品系不同，可得5-20×107细胞/只。2．手术器械灭菌：术前高压灭菌外，也可将手术器械泡在95%酒精的小容器中

3、，使用前取出器械，在酒精灯上烧灼去除酒精，即可保证无菌，此法较为简便。乘除法运算法则1、整数乘法法则：1）从右边起，依次用第二个因数每位上的数去乘第一个因数，乘到哪一位，得数的末尾就和第二个因数的哪一位对齐；2）然后把几次乘得的数加起来。（整数末尾有0的乘法：可以先把0前面的数相乘，然后看各因数的末尾一共有几个0，就在乘得的数的末尾添写几个0。）2、小数乘法法则：1）按整数乘法的法则算出积；2）再看因数中一共有几位小数，就从得数的右边起数出几位，点上小数点。3）得数的小数部分末尾有0，一般要把0去掉，进行化简。仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除

4、谢谢4精品好文档，推荐学习交流3、分数乘法法则：  把各个分数的分子乘起来作为分子，各个分数的分母相乘起来作为分母，然后再约分。4、整数的除法法则1）从被除数的高位起，先看除数有几位，再用除数试除被除数的前几位，如果它比除数小，再试除多一位数；2）除到被除数的哪一位，就在那一位上面写上商；3）每次除后余下的数必须比除数小。5、除数是整数的小数除法法则：1）按照整数除法的法则去除，商的小数点要和被除数的小数点对齐；2）如果除到被除数的末尾仍有余数，就在余数后面补零，再继续除。6、除数是小数的小数除法法则：计算除数是小数的除法，先移动除数的小数点，使它

5、变成整数；除数的小数点向右移动几位，被除数的小数点也向右移动几位（位数不够的，在被除数的末尾用“0”补足）；然后按照除数是整数的除法法则进行计算。1）先看除数中有几位小数，就把被除数的小数点向右移动几位，数位不够的用零补足；2）然后按照除数是整数的小数除法来除。7、分数的除法法则：1）用被除数的分子与除数的分母相乘作为分子；仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢4精品好文档，推荐学习交流2）用被除数的分母与除数的分子相乘作为分母。（即被除数不变，乘除数的倒数）仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢4