南高丛蓝莓组培再生技术探究

南高丛蓝莓组培再生技术探究

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1、南高丛蓝莓组培再生技术探究  摘要南高丛蓝莓品种组培再生技术研究结果表明,外植体以0.1%升汞处理10min为适宜的灭菌方法,污染率为20.0%,同时萌发的正常芽率也达67.5%;蓝莓芽诱导初代增殖培养以附加ZT1mg/L为宜,增殖倍率可达5~6倍,继代培养以ZT1mg/L与ZT2mg/L交替使用为宜,增殖率可达10~15倍;蓝莓试管苗附加IBA0.3mg/L生根效果最佳,有效生根率达55.38%;蓝莓试管苗驯化以苔藓为基质,驯化苗成活率可高达85%以上;蓝莓试管苗瓶外生根的繁殖速率是瓶内生根的1.7~2.6倍。关键词南高丛蓝莓;组培再生技术;诱导;驯化;激素;基质中图分类号S

2、663.9;Q813.1+2文献标识码A文章编号1007-5739(2011)21-0119-02蓝莓(Blueberry)又名越橘,属杜鹃花科越桔属多年生浆果类灌木。喜土质通气、疏松、有机质含量高、湿润的酸性沙壤土、沙土或草炭土[1-3]。蓝莓常规繁殖的速度较慢,品种容易退化,利用组培快繁技术,既可加快繁殖速度,又能保持品种种性[4-6],因此本试验对南高丛蓝莓的组培快繁技术进行了研究。1材料与方法61.1试验材料供试材料为南高丛蓝莓品种。1.2试验方法1.2.1不同灭菌剂对灭菌效果的影响试验。设6个处理,分别为:0.1%升汞浸泡5min(A1)、10min(A2)、15mi

3、n(A3);5%次氯酸钠浸泡10min(A4)、20min(A5)、30min(A6)。试验以当年生的南高丛蓝莓绿枝枝条作为外植体,流水冲洗2h后备用。每个处理在升汞浸泡前用75%酒精浸泡30s,升汞浸泡后用无菌水冲洗5次。1.2.2培养条件。以WPM为基本培养基,附加不同激素,蔗糖20g/L,琼脂粉6.0g/L,pH值5.2~5.4,培养基在121℃、131kPa的条件下灭菌20min。培养室温度25℃,光照强度2000~3000lx,光周期为16h光照/8h黑暗。1.2.3不同激素及浓度对蓝莓芽诱导的影响试验。设7个处理,分别为:6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L(B

4、1);ZT1mg/L(B2)、2mg/L(B3)、3mg/L(B4);6-BA1mg/L(B5)、2mg/L(B6)、3mg/L(B7)。按照各试验设计处理蓝莓茎段,培养45d后观察正常芽增殖倍数和萌芽外植体数。1.2.4不同IBA浓度对试管苗生根诱导的影响试验。设3个处理,分别为:IBA0.1mg/L(C1)、0.3mg/L(C2)、0.5mg/L(C3)。在1/2WPM培养基上添加试验设计的不同浓度的IBA,接入试管苗嫩茎的新梢和中段,先遮光培养76d,后转入光培养28d后观察根的生长情况。1.2.5不同基质处理对试管苗驯化的影响试验。试管苗的驯化选择3种基质:进口泥炭(D

5、1)、泥炭∶黄泥=3∶2(D2)、苔藓(D3),观察试管苗驯化苗生长情况。1.2.6组培苗试管外生根试验。由于蓝莓组培试管苗培养时生根慢且生根率低,可采用试管外组培苗生根的方法节约生产成本,以拓展蓝莓试管苗生根途径。在瓶外生根前将继代45d左右的组培苗移到与驯化相似环境中炼苗7d左右。扦插前洗净组培苗根部附着的培养基,将组培苗剪成1.5~2.0cm的茎段,在绿维康系列强力生根A号稀释液中浸5s后捞出,扦插于苔藓基质苗床上,并立即扣拱棚保湿,20d后逐渐揭膜通风,40d后统计生根成活率。2结果与分析2.1不同灭菌剂对灭菌效果的影响由表1可知,处理A1、处理A4、处理A5灭菌不充分

6、,污染数超过85%;处理A3、处理A6灭菌过度,尽管污染数少,但已经影响到苗的正常生长;处理A2污染率为20.0%,同时萌发的正常芽率也达67.5%,为适宜的灭菌方法。2.2不同激素及浓度对蓝莓芽诱导的影响由表2、图1可知,处理B2效果较好,培养10d后在外植体基部产生黄绿色愈伤组织,在节处有丛芽生长,培养306d后,增殖芽数可达5.86倍,且主枝芽多,丛芽粗壮,利于作为生根苗培养;而处理B3尽管增殖芽倍数高,但侧枝芽偏细,以侧枝芽增殖为主,且基部愈伤块大,为褐色;若以处理B2与处理B3交替使用较为理想,既保证增殖苗的质量,又可达到较大的增殖效果;处理B4产生透明状愈伤组织,易

7、形成玻璃苗;处理B5、处理B6、处理B7培养45d后观察,外植体生长处于停滞状,既不萌芽生长,也未褐化死亡。2.3不同IBA浓度对试管苗生根诱导的影响由表3可知,IBA可有效地促进蓝莓试管苗的生根,其中处理C2有效生根率最佳,新梢生根率可达59%,合计生根率达55.38%,且上部叶片绿色,植株生长健壮,根粗壮而长;随着激素浓度的升高,试管苗基部愈伤组织团越明显,有效生根率下降,根组织疏松。2.4不同基质处理对试管苗驯化的影响由表4、图2可知,处理D1pH值6.5,驯化苗成活率仅为31.9%;

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