黄连等六味中药对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长的影响

黄连等六味中药对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长的影响

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1、黄连等六味中药对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长的影响摘要:将六味治疗腹泻的常用中药黄连、黄柏、秦皮、白头翁、地锦草、马齿苋煎汁后,各按5%用量加入营养肉汤和20%PTYG液体培养基中,再分别接种双歧杆菌和大肠杆菌,于适宜的条件培养后,进行菌落计数。结果发现:黄连对双歧杆菌的生长略有抑制,但幅度较小;其余各药对双歧杆菌均无明显的抑制作用;而六味中药对大肠杆菌的生长均有明显的抑制作用。关键词:中药;大肠杆菌;双歧杆菌;生长一般认为,当有害菌在肠道内大量增殖占绝对优势时,会使益生菌的生长受抑制,结果造成肠道

2、菌群异常而引起腹泻[1]。人们已根据黄连、黄柏、秦皮、白头翁、地锦草、马齿苋等六味中药对肠道致病菌有良好的抑制作用,研制出各种制剂治疗肠道疾病[2]。但这六味中药是否会对双歧杆菌等肠道益生菌产生影响,目前的研究报道还较少。并且,过去对病原菌的抑菌试验多采用平皿法,而少见试管法。为此,笔者采用试管法,观察了上述六味中药对大肠杆菌和双歧杆菌在体外生长的影响,以期更加全面地对中药治疗腹泻的机理进行进一步地探索。1材料与方法1.1材料1.1.1中药黄连(CoptisChinensisFranch)、黄柏(

3、Phel-lodendronChinenseSchneid)、秦皮(CortexFraxiniCaulis)、白头翁(amenone)、地锦草(HerbaEuphorbiaeHunifusae)、马齿苋(PortulacaOleraceaL.),由本院中药实验室提供。1.1.2菌种大肠杆菌(E.Coli)、短双歧杆菌(B.Breve)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)为本实验室保存菌种,均经中国科学院微生物研究所鉴定。1.1.3培养基PTYG培养基、营养肉汤,按有关文献配制[3,4]。

4、20%PTYG培养基,是将PTYG培养基组分按20%量配制。1.1.4仪器超净工作台、高压蒸汽灭菌锅(上海核子实验仪器厂);恒温培养箱、SYQ型厌氧培养箱(上海跃进实验器械厂)。1.2方法1.2.1中药的制备将黄连、黄柏、秦皮、地锦草、白头翁、马齿苋六味中药,用纱布分别包扎,分别加水煎汁浓缩至浓度为1g/ml,放入4e冰箱备用。另将秦皮、黄连、黄柏、白头翁按质量比(8B3B6B8)配合成方,煎成白头翁汤(即经验配方)[2],浓缩至含药1g/ml。1.2.2对大肠杆菌生长影响试验将六味药汁和白头翁汤

5、按015ml剂量分别加入装有9ml营养肉汤培养基的试管各5支中,另取5支营养肉汤对照管,于115e、30min灭菌后,将大肠杆菌培养液015ml接种于各试管,于37e温箱中培养18~24h。后利用营养琼脂培养基作大肠杆菌菌落计数。1.2.3对双歧杆菌生长影响试验先将双歧杆菌于PTYG培养基中增菌培养,活菌浓度控制在1@108/ml。将六味药汁和白头翁汤按015ml剂量分别加入装有9ml20%PTYG液体培养基的试管中。另取20%PTYG液体培养基对照管,于115e、30min灭菌后,将短双歧杆菌、

6、青春双歧杆菌增菌液015ml分别接种于上述试管中,每种作5个平行管,于厌氧培养箱中37e培养48h后,以PTYG培养基作平板菌落计数。2结果结果见表1。从表1中可知,六味中药对大肠杆菌的生长均有明显的抑制作用,其中以黄连的抑菌作用最为明显,黄柏次之,其余几味相差不大。另外,白头翁汤中各药均对大肠杆菌有明显抑制作用,但四药合方后对大肠杆菌的抑制作用并未有明显增强。黄连对双歧杆菌的生长略有抑制,但幅度较小;其它几味中药对双歧杆菌的生长没有明显的影响。表1中药对大肠杆菌和双歧杆菌生长的影响(CFu/ml

7、)菌株对照黄连黄柏秦皮白头翁马齿苋地锦草白头翁汤大肠杆菌1.6@1091.1@1069.8@1061.7@1072.5@1072.2@1072.3@1071.2@107短双歧杆菌2.4@1071.2@1071.8@1071.8@1072.0@1072.1@1072.2@1071.8@107青春双歧杆菌4.3@1071.7@1073.5@1073.7@1074.0@1074.0@1074.5@1073.5@107收稿日期:2003-07-26作者简介:孙力军(1965-),男,硕士,副教授,长期从事

8、微生物生态乳酸细菌的研究。3讨论3.1据报道,通过平皿试验得知,白头翁汤合剂中四药的抗菌作用以黄连、秦皮为强,黄柏次之,而白头翁最弱[2]。但本试验所得结果为黄连最强,依次为黄柏、秦皮、白头翁。由于7调查研究时间仓促,我们没有验证六味中药平皿抑菌试验的结果,因此,还有待于比较两方法的差异,查明两方法得出不同结果的原因。此外,由于条件所限,本实验仅采用5%的加药量,其它浓度加药量效果如何,仍有待于进一步研究。3.2有研究报道,白头翁汤中各药无协同或拮抗作用,且白头翁汤中去掉黄连后仍有

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