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1、不同浓度的中药合剂对双歧杆菌增殖的影响摘 要 本实验测定了21种不同浓度的中药合剂对双歧杆菌增殖的影响,结果显示:¹其中11种中药对双歧杆菌具有不同程度的促增殖作用。º某些药物对各个浓度虽均有一定的促双歧作用,但在其中某一个浓度下作用最强。»有些药物在不同浓度,对双歧杆菌增殖的影响截然不同,分别表现出促进、无影响或抑制。从此提示:在测试中药对细菌的作用时,应尽可能多选择几个浓度。关键词 中药 浓度 双歧杆菌 双歧杆菌是人体重要的生理性细菌,寻找促进双歧杆菌增殖的物质,用以提高人体内双歧杆菌的水平,或促进体外培养液中双歧杆菌的增殖,是许多学者关注的课题之一。不同研究者报告的某些中药对双
2、歧杆菌作用的结果不完全一致,其中一个重要原因是实验的药物浓度不同,也就是说,某一种药物对双歧杆菌生长繁殖的影响究竟是抑制、促进、还是无益,与药物浓度密切相关,不能一概而论。我们研究的21种中药,取不同浓度对双歧杆菌作用的效果就说明了这一点。1 材料与方法1.1 中药合剂及制备 选用具有益气健脾的中药共21种、它们是:莱菔子、桠葫芦、党参、玄参、马勃、阿胶、猪苓、芦根、黄芪、败酱草、茯苓、甘草、五味子、栀子、竹茹、生地、枸杞、陈皮、当归、半夏、葛根。购自石家庄市乐仁堂药房。以上中药各称取5克,加水20-50ml,浸泡24小时、煎煮30分钟后过滤浓缩呈5ml,制备成含生药1g/ml的药液,
3、将此液定为100%浓度。1.2 菌株及培养 双歧杆菌DM8504株。实验用培养基为BS液体,固体培养基,本室自行配制。1.3 菌液准备 将双歧杆菌划线接种在BS斜面培养基上,37℃培养48小时,加少量生理盐水吹刮菌苔成菌悬液,再用生理盐水将此菌悬液进行十倍连续稀释、配成含10个/ml浓度的菌液,为试验用液。1.4 不同浓度中药培养液的制备 用BS液体培养基将实验用药稀释至50%、25%、12.5%三个浓度,同时设BS培养基对照,中药原液(100%)对照。1.5 试验方法 用微量移液管在以上各管中加入菌液0.1ml,37℃培养24小时,取各管培养物0.1ml,经无菌生理盐水稀释,采用文献
4、报道滴注法〔1〕接种至BS固体培养基上,37℃培养48小时后计数,以平均菌落数计算出每毫升培养液中的活菌数。每一种药物按以上方法重复2-3次,各次试验的均数为最后的结果数据。2 结 果2.1 以“药物试验管菌落均数”与“BS对照管菌落均数”之比D/C值做为判定增菌作用的指标,D/C值在2以上的共有11种中药,包括:莱菔子、桠葫芦、猪苓、马勃、阿胶、黄芪、败酱草、芦根、党参、茯苓、玄参。2.2 某些药物,虽然在各个浓度都有促双歧作用,但在其中一个浓度作用最强,如桠葫芦,促双歧最强浓度为25%,D/C值高达35.8,而浓度为50%及12.5%时,D/C值分别为2.4、3.5,具有类似情况的
5、中药还有莱菔子、马勃、阿胶、猪苓(见表1)。2.3 有的药物在不同浓度,对双歧杆菌·29·中国微生态学杂志1997年第9卷第5期表现为抑制,无影响或不同的促进影响,例如黄芪 在50%、25%、12.5%浓度的D/C值分别为0.04、1.4和9.3,其他有类似情况的中药有芦根、败酱草、党参、玄参、茯苓(见表2)。表1 刺激双歧杆菌生长的最佳药物浓度药物名称试验管菌落数/对照管菌落数(D/C值)50%管25%管12.5%管桠葫芦2.435.8*3.5莱菔子2832.646.5*马 勃0.5823.3*6.7阿 胶3.716.3*11.6猪 苓28*11.62.3 *:为最高D/C值。表2
6、 药物浓度对细菌生长的不同影响药物名称试验管菌落数/对照管菌落数(D/C值)50%管25%管12.5%管桠葫芦4.30.850.54黄 芪0.041.459.3败酱草0.015.580.25党 参0.370.953.75玄 参0.0160.22.5茯 苓0.023.472.63 讨 论在实践中为避免试验误差,我们将D/C均值在2以上者确定为有明显增菌作用的药物及其浓度。传统的中草药与微生态以及某些正常细菌的关系,国内有多位学者曾在这方面做了大量的工作,如陈聪敏〔2〕曾用中药大黄,造成小鼠脾虚模型,通过肠菌群测定,双歧杆菌,乳杆菌等优势菌均减少,而给予扶正固本的中药治疗后,优势菌增加,恢
7、复正常功能。杨景云〔3〕等研制的中药903口服液已证明可以调整肠菌群,增加优势厌氧菌的生长。也有一些学者利用单味药,如云芝、刺五加、枸杞等,在试管内或平皿上证明具有促进双歧杆菌增殖的作用。考虑到祖国医学与微生态学在原理上,观念上的某些吻合,我们选取的21种中药都是具有益气健脾、扶正固本作用的,采用水煎服的方法,解析出以多糖为主的成份,发现其中11种药在一定浓度下,具有程度不等的刺激双歧杆菌增长的作用,实验还显示:中药的浓度对双歧杆菌的增殖有着明
