中草药对双歧杆菌生长的影响

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1、中草药对双歧杆菌生长的影响提要本文选用15种传统杭衰老中药对双吱杆菌进行了体外生长促进实验。结果发现刺五加、五味子、宁夏构祀子及阿胶对婴儿双吱杆菌有明显的促进作用。双歧杆菌是一类多形态、无芽胞革兰氏阳性杆菌。该菌营养要求高，需要外源性生长因子，即双歧因子。该因子能刺激双歧杆菌的生长。现已证实双歧杆菌因子有两种，一种是含有N一乙酞葡萄糖胺的多聚物，另一种是寡聚糖〔‘’。本文旨在探讨阿胶，五味子，构祀及刺五加对双歧杆菌的生长的促进作用。100毫升，蒸溶，备用。1.4中药纸片:用国产新华1号滤纸，打孔制成直径6mm纸片。干燥灭菌(1200C)2小时。每100张纸片加lml中药液，

2、使其浸匀，再分别置无菌平皿在37℃烘干〔，，。1材料与方法1.1主要仪器:721分光光度计(四川分析仪器厂)、超净工作台、厌氧培养系统、Olympus双目显微镜(日本)、麦氏比浊管。1.2菌株:实验所用菌株为婴儿双歧杆菌Bif1104，由中国预防医学中心流行病微生物研究所提供。实验时，取该菌接种于BL肉汤和BL血平板，置厌氧罐，用抽气换气法进行厌氧培养。35℃经48小时培养后，用无菌盐水洗三次，每次2000Xg离心15分钟，用麦氏比浊管调整菌液浓度为1.5亿/ml备用。1.3中药:本试验采用的中药为阿胶，五味子，刺五加，构祀等均购自重庆市中药材公司。试验时，取五味子、人参、

3、菌灵芝、熟地、黄精、黄蔑、获等、天冬、营蒲、何首乌、杜仲、冤丝子、刺五加、构祀各50克，分别各加水200毫升，置300瓦电炉上加热煮沸1小时，最后浓缩制成100毫升药液。取30克阿胶，加水2实验方法2.1纸片法:取上述制备好的菌液用一定大小的棉签均匀涂布于BL血平板上。涂布的细菌量以不完全融合生长为宜，然后贴上上述中药纸片，每个平皿贴4片，用1个平皿作对照(贴有不含中药纸片)。厌氧培养350C48小时后，观察细菌生长情况，涂片，革兰氏染色，油镜镜检。2.2试管法:用接种环取上述制备菌液2接种环至lOmIBL肉汤培养基内，然后分别加入中药浓缩液。.1毫升，另取一支不加中药作对

4、照.厌氧培养350C48小时后，观察细菌生长情况，涂片，染色，镜检，证实为革兰氏阳性杆菌，有分叉等后，再于721分光光度计比浊测定各管光密度(波长650mm，光径lcm)。计算各管菌液浓度。3结果3.1纸片法结果经厌氧培养350C48小时后，发现贴有阿胶，刺五加，五味子，构祀四味中药中国徽生态学杂志1996年第a卷第2期的纸片周围细菌生长极为茂盛，有酸臭味，呈菌苔生长，菌苔呈灰色，平板由红色变为巧克力色.涂片，革兰氏染色发现上述四味中药纸片周围细菌染色典型，菌体粗大。3.2试管法结果表1各味中药对双吱杆菌生长作用的影响光密度(OD)细菌数(mg/ml)培养基对照五味子刺五加

5、人参菌灵芝熟地0.450.234.583.750.380.421.913.170.420.423.503.503.50门01了n，目1二心.几月0UdO曰‘，..…︸.二︸.几，目n乙七以0.14o.zo精蔑等冬黄黄获夭以0.百瀚何首乌o.o.35ss杜仲冤丝子0.420.323.502.s7从以上实验结果可以看出，阿胶，五味子，拘祀，刺五加这四味中药能促进双歧杆菌的生长，分别比对照组高出百分率为75.800,50%,40.5%和21.70o04讨论双歧杆菌营养要求高，因此，在体外培养中许多物质对双歧杆菌有影响.Poch}”的试验表明，除青春双歧杆菌和长双歧杆菌能在人工培基

6、上生长外，所有其它的双歧杆菌在体外培养中均需添加生长促进剂.双歧杆菌在含有牛奶的人工培养基上生长良好〔‘，。但Balmer'S〕指出，尽管不少学者在使用牛奶代替人乳这方面作出了许多努力，但母乳喂养与人工喂养婴儿肠道内双歧杆菌数量仍存在较大差别。他发现乳清有双歧因子的作用，他对乳清、酪蛋白及人乳促进双歧杆菌生长作用进行了实验研究。结果发现:大多数用乳清喂养婴儿在第14天肠道内开始有双歧杆菌定植，而酪蛋白组肠道内大多数是类杆菌和肠球菌定植。提示乳清中含有双歧因子。Balmer`6，的进一步实验发现，人乳含有的乳铁蛋白较牛奶多。Petschow"，也用体外实验研究了人乳、牛奶乳清

7、蛋白和酪蛋白水解物对双歧杆菌的生长促进作用。发现双歧杆菌的生长促进作用直接与乳清中特异因子的浓度相关。Bezkorvainy`e，发现柠檬酸、血清转铁蛋白、苹果酸、秋水仙碱、氟醋酸盐、鱼腾酮等对双歧杆菌的生长没有影响，而氰化物、叠氮化物、2}4一二硝基苯酚、血红蛋白、血红素等对双歧杆菌生长有抑制作用。进一步研究发现:铁离子是双歧杆菌生长所必需的营养成份，铁叶琳系统在双歧杆菌代谢过程中发挥着重要作用。双歧杆菌生长还需要锰、锌和铜离子，这些金属离子对双歧杆菌的生长起关键作用。牛酪蛋白消化液和酵母浸出液对所有双歧杆菌的生