迟缓爱德华氏菌 铁蛋白 dps(dna-binding proteins from starved cells)论文

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1、迟缓爱德华氏菌论文：铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究【中文摘要】Dps(DNA-bindingproteinsfromstarvedcells)属于铁蛋白超家族,是原核生物中特有的一类能结合铁离子、抗氧化损伤和保护DNA的重要功能蛋白。本研究在迟缓爱德华氏菌株TX01中克隆得到了Dps家族的两个基因dps1和dps2。将dps1和dps2基因在大肠杆菌中重组表达后,获得的可溶性蛋白rDps1和rDps2具有DNA结合功能和铁氧化酶活性。为了检测dps1和dps2的功能作用,我们构建了dp

2、s1和dps2的单基因缺失突变株TXDps1和TXDps2以及突变菌株TXDps2的dps1基因抑制表达菌株TXDps2RI。与野生型菌株TX01相比,TXDps1和TXDps2的生长没有显著性差异,但TXDps2RI的逆境生长能力降低;TXDps1、TXDps2及TXDps2RI的抗氧化损伤、抗紫外线辐射能力皆明显减弱,但TXDps2RI的减弱程度较TXDps1和TXDps2更显著。毒力分析表明,与野生型菌株TX01以及TXDps1和TXDps2相比,TXDps2RI在牙鲆PBL中的生存复制能力显著

3、降低,对牙鲆组织的感染能力大幅下降。综上所述,本研究证明了Dps1和Dps2具有保...【英文摘要】DNA-bindingproteinfromstarvedcells(Dps)isamemberofferritin-likeproteinsthatexhibitpropertiesofnonspecificDNAbindingandironoxidationandstorage.Inthisstudy,weexaminedthebiologicalpropertyandfunctionoftwoDp

4、sproteins,Dps1andDps2,fromEdwardsiellatarda,animportantfishbacterialpathogen.RecombinantDps1andDps2purifiedfromEscherichiacoliwereabletomediateironoxidationandbindDNA.ToexaminethefunctionalimportanceofDps1andDps2,threemutantE.tarda...【关键词】迟缓爱德华氏菌铁蛋白Dps(

5、DNA-bindingproteinsfromstarvedcells)【英文关键词】EdwardsiellatardaferritinDps(DNA-bindingproteinsfromstarvedcells)【目录】铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究摘要4-5Abstract5第一章前言9-261.1迟缓爱德华氏菌研究概况9-151.1.1迟缓爱德华氏菌生物学特征91.1.2迟缓爱德华氏菌的危害9-101.1.3迟缓爱德华氏菌致病因子的研究10-151.1.4迟缓爱德华氏菌病的防治

6、151.2细菌Dps家族的研究15-251.2.1Dps蛋白的结构16-171.2.2Dps蛋白的功能17-211.2.3Dps蛋白调控21-241.2.4Dps蛋白与细菌毒性24-251.3本论文的研究意义及目的25-26第二章迟缓爱德华氏菌Dps1与Dps2蛋白序列的生物信息学分析26-372.1材料和方法26-332.1.1实验材料26-282.1.2菌株TX01基因组DNA的提取28-292.1.3菌株TX01Dps家族基因的获得29-332.1.4序列比对332.2实验结果33-352.2.

7、1基因组DNA提取结果33-342.2.2基因的PCR扩增结果342.2.3序列比对结果34-352.3分析与讨论35-37第三章重组蛋白rDps1与rDps2的表达纯化和功能分析37-493.1材料和方法37-443.1.1实验材料37-393.1.2Dps1与Dps2蛋白的原核表达菌株的构建39-413.1.3rDps1与rDps2蛋白的表达41-423.1.4rDps1与rDps2蛋白的纯化42-433.1.5rDps1与rDps2蛋白的抗氧化活性检测433.1.6rDps1与rDps2蛋白的结

8、合DNA活性检测43-443.2实验结果44-463.2.1rDps1与rDps2蛋白的表达纯化443.2.2rDps1与rDps2蛋白的铁氧化酶活性44-453.2.3rDps1与rDps2蛋白的结合DNA功能45-463.3分析与讨论46-49第四章dps1与dps2基因缺失突变株的构建和功能分析49-764.1材料和方法49-654.1.1实验材料49-514.1.2迟缓爱德华氏菌TX01dps1与dps2缺失突变片段的克隆51-524.1.3基因