天麻粉改善脂肪乳剂灌胃大鼠肝脏脂肪变性实验探究

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1、天麻粉改善脂肪乳剂灌胃大鼠肝脏脂肪变性实验探究　　[摘要]目的研究天麻粉对脂肪乳剂灌胃大鼠肝脏脂肪变性的作用。方法采用雄性SD大鼠，以脂肪乳剂灌胃建立高血脂和脂肪肝模型，共28只大鼠随机分为4组，分别为基础饲料对照组、脂肪乳剂灌胃组、脂肪乳剂灌胃+天麻粉250mg/kg和525mg/kg组，每组7只，疗程28d。实验前后测定大鼠体重、血清总胆固醇（CHO）、三酰甘油（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。实验结束后处死动物，取肝脏称重并计算肝指数。取肝组织固定、切片，H&E染色进行病理学检查观察肝脏脂肪变性程度并照相

2、。另取部分肝组织提取脂肪测定其中CHO和TG含量。结果脂肪乳剂灌胃28d后大鼠出现显著高脂血症，肝脏重量和肝指数显著增加；与基础饲料对照组比较，脂肪乳剂灌胃组7只大鼠均出现中、重度肝脏脂肪变性，肝脏CHO和TG含量增加以及肝功能损害。脂肪乳剂灌胃+天麻粉525mg/kg组大鼠血清中CHO、LDL-C和TG水平较脂肪乳剂灌胃组分别降低24.6%、23.2%和30.4%，差异有统计学意义（P　　1.2.2动物分组与给药实验设4组，每组7只动物，分别为基础饲料对照组、脂肪乳剂灌胃组，以及脂肪乳剂灌胃+天麻粉250mg/kg和5258mg/kg组。实验方法参照中华人民共和

3、国卫生部《保健食品检验与评价规范》（2003年版）“功能学评价程序和检验方法，辅助降血脂功能检验方法动物实验脂代谢紊乱模型法——预防性给受试样品”进行设计[12]。动物适应性饲养3d后，除基础饲料对照组外，其余动物均给予脂肪乳剂灌胃，剂量为20mL/kg。脂肪乳剂灌胃在上午进行，天麻粉给药治疗在下午进行。天麻粉配制及口服给药方法参照笔者先前的研究工作。脂肪乳剂和天麻粉按照所设定剂量连续给予28d，期间动物自由进食和饮水。实验前后称量动物体重。1.2.3肝脏病理学检查及相关指标测定给药28d后，所有动物禁食12h，称重并眼眶取血后断颈处死。测定血中CHO、TG、LD

4、L-C、ALT、AST含量。解剖取出肝脏，肉眼观察其形态；再称取肝脏湿重并计算肝指数（肝指数=肝脏重量/体重的百分数）。取肝左叶用10%福尔马林固定，石蜡包埋5μm切片，进行H&E染色以及肝组织病理学观察，了解肝组织脂肪变性程度并照相。肝组织脂肪变性程度分级参照文献[13]进行。轻度：脂肪变性肝细胞不超过肝小叶1/3；中度：脂肪变性肝细胞占肝小叶1/3～2/3；重度：病变呈弥漫性，脂肪变性肝细胞超过肝小叶2/3。剩余肝脏置-70℃冰箱保存备用。称取相同部位肝组织0.2g置于1mL异丙醇中，参考文献[14]方法进行匀浆后抽提肝脏总脂肪并测定其中CHO和TG含量，以m

5、mol/g肝组织表示。81.3统计学方法采用SPSS11.0统计软件进行数据处理和分析。计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；以P　　3讨论NAFLD作为慢性肝病的一种在全世界范围内已引起越来越多的重视，但目前尚缺乏有效的治疗方法。目前临床常用的治疗NAFLD的药物包括胰岛素增敏剂、调血脂药、抗氧化剂和保肝药等[5]。但由于上述药物有的自身有一定不良反应如肝损害等，故限制了其应用。因此，研发新型的治疗NAFLD的药物仍然是当务之急。与化学药物相比，我国传统的天然药物来

6、源广泛、历史悠久，从中有可能筛选出有效的治疗NAFLD的药物。但就目前而言，尽管有较多的利用中药复方治疗肝脏脂肪蓄积和变性的报道，利用具有明确化学结构的单体天然药物来治疗脂肪肝的报道仍然较少。有报道姜黄素在大鼠NAFLD模型中具有较好的改善肝脏脂肪变性和肝功能、减少肝脏炎性反应的药理作用[15]。8本文的研究表明，天麻，一种具有明确化学结构的小分子天然药物，在大鼠高血脂和脂肪肝模型中具有良好的改善肝脏脂肪变性的作用。在本文中，笔者采用了脂肪乳剂灌胃的方法建立模型。有文献表明脂肪乳剂灌胃能够在较短时间内（约3周）形成稳定的大鼠高血脂和脂肪肝模型[11]。本文结果与文

7、献[11]报道相符，脂肪乳剂灌胃4周后大鼠血脂较基础饲料对照组显著增高而且出现了中、重度肝脏脂肪变性。天麻粉在脂肪乳剂灌胃大鼠中能剂量依赖性降低血清CHO、LDL-C和TG，而且对TG的效果较CHO更强，这与笔者之前的报道是符合的[8]。除了血脂以外，本文最重要的发现是天麻粉对肝脏的作用。肝脏是脂肪代谢的最重要器官之一，天麻粉能有效减少肝脏中的CHO和TG含量，改善脂肪乳剂灌胃所引起的大鼠肝脏脂肪变性、肝肿大和肝指数增加，进而改善肝功能。天麻对肝脏的保护作用原先已有报道，如有研究表明天麻的主要成分天麻素对四氯化碳造成的肝细胞损伤有一定保护作用[16]，还可明显改善

8、长春新碱所