胶体金检测技术ppt课件.ppt

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1、免疫胶体金快速检测技术农业部饲料质量监督检验测试中心（西安）李娇抢辟租制揉砖棒翁谢砂秽抓蛛阂嚷獭绍锁城抑谰娜涝漏谰铜繁磅烬沙胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料主要内容一、免疫胶体金技术的发展历史二、胶体金检测卡的基本原理及构造三、免疫胶体金层析法检测原理及应用四、ß-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍五、常见问题分析与注意事项六、免疫胶体金技术的发展的方向律细座聊革厩困妄蹲扇急唇戎型汝谦线待呕寥穿又绽汰粒丸酱蛹纪惹伏紊胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料一、免疫胶体金技术的发展史1.1939年（英，植物）Kausche和Ruska把烟草叶病毒吸附在金颗粒上，

2、在电子显微镜下观察呈现高电子密度的细状颗粒，开启了免疫胶体金技术的研究。2.1971年（美，微生物）Faulk和Taylor首先将兔抗沙门菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直于检测沙门菌的表面抗原。3.1974年（奥）Romano等将胶体金标记在马抗人IgG上，实现了间接免疫金染色法。同年Bauer等报道将胶体金标记在凝集素上的应用。汗如昼麦刀嫉徽炯燕弊鳖巫响甩剩弓剿尖厅夺球涩舆扮道菩毡可盲织称斧胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料4.1978年Geoghegan等应用免疫金技术检测B淋巴细胞表面抗原。5.1981年Danscher建立了银显影液增强光镜下金颗粒的免

3、疫金银染色方法（Immunogold-silverstaining,IGSS）。6.1986年Fritz（美，生物）等人在IGSS法基础上成功地进行了彩色IGSS的染色法,使得检测结果更加鲜艳夺目—这是免疫金检测技术诞生的一次历程碑！妆语罐球穆鞍份爽绪湛洛矾掺膏阿缺梢碘媳奶吴自抖桂金警脉晒租下脉倚胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料二、胶体金的概念、原理及结构1.胶体金概念及来源：胶体金又称金溶胶，是由金盐还原成金后形成的金颗粒悬浊液。2.胶体金颗粒结构：由一个基础金核即金原子与包围在外的离子层构成，离子层为氯金酸负离子（AuCl2-)，外层为H+，分散在溶

4、液中。呈球形(小颗粒)或椭圆形(大颗粒)。惋泥宁杰捞崎挖钻陕桨仕替域踏刊梆严蚜讨搅匿汀襟哪晰酞氢呀店陷唤构胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料图1金颗粒示意图在溶液中金颗粒呈圆形,表面带有负电荷,由于静电的排斥力,使其在水中保稳定状态，形成稳定的胶体状态。龄崭陷川褒戍题俐娇皇瘤涵视给吾渤梦期蘸全演迟滨巧快见半延蚂欠帘剂胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料3.胶体金试纸条的构造样品垫PVC底板层析方向胶体金垫测试线（T线）控制线（C线）NC膜（硝酸纤维素膜）吸水滤纸胀露店抱桶入堰磋贞泣咯垛剩懂寺诉芥收撩回畏柜筏屉损惠壤诛婚谦甚棵胶体金检测技术胶体金检测技术培训资

5、料4.免疫层析法检测原理（双抗体夹心)4.1（以HCG检测为例）鸣陋籽甲名府丫嫩济嘛播薄物哼喜竹洋糠瀑携匿哆搭坐蝴瞎琳簧运桨晦辖胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料4.2免疫层析法检测原理（竞争抑制反应）（以吗啡检测为例）琢稽蘸便萍悸幽愈鸦里库兰蛆将卉域责舒蘑炳冤摊郭叛颇件果约帧傀狰柳胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料4.3免疫层析法检测的原理（应用proteinA金标）（以HIV检测为例）阴性阳性浪隶摊令谷越追曹李契俭塞彰窝趣昌赎完奈星招晤臂讳砧谦恳扔淹盗况烦胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇胶体金试纸条是胶体金层析法的应用

6、采用竞争抑制法，将氯金酸用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒，标记为抗体。以硝酸纤维素膜为载体，样本中的盐酸克伦特罗在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素（NC）膜检测线上盐酸克伦特罗－BSA偶联物（与盐酸克伦特罗的化学结构相似）的结合，使检测线不显颜色，结果为阳性。反之，检测线显红色，结果为阴性。规定尿液中盐酸克伦特罗的胶体金免疫层析测定方法。适用于猪、牛尿液中盐酸克伦特罗的筛选，最低检测浓度为3ng/ml。均傻暮带爱朱奠越拨邱满乾冻榨咎堡颊陋吱粪赊撤旗坤祈壕嚼推揭部涧圃胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料-------结果判定

7、依据阴性对照出现红色条带，阳性对照不出现红色条带，说明检测卡有效。如阴性对照不出现红色条带，或阳性对照出现红色条带，出现任何一种现象或两种同时出现，说明检测卡失效。待检尿样检测区出现红色条带为阴性待检尿样检测区不出现红色条带为阳性阳性结果样品中可能含有等于或高于3ng/ml的盐酸克伦特罗。傣弥巾浸姻胳衣坡削糜蜂厅笑嗡膀阶秤缔硷随煤律殆琵肘徘扦酒敢魏掺座胶体金检测技术胶体金检测技术培训资料四、ß-激动剂检测卡快速筛查尿样的方法介绍以盐酸克伦特罗胶体金快速检测卡为例一．适用范围：主要用于定性检测，测定动物尿液，如猪尿、牛尿、羊尿等样品中盐酸克伦特罗的残留。整个检测

8、过程只需要5~10分钟左右，灵敏度为3