磁导靶向给药在荷瘤小鼠体内分布特性实验探究

《磁导靶向给药在荷瘤小鼠体内分布特性实验探究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、磁导靶向给药在荷瘤小鼠体内分布特性实验探究　　[摘要]目的考察经磁导靶向给药载阿霉素金磁复合微粒在荷瘤小鼠体内分布特性。方法建立小鼠肝细胞癌动物模型，将30只小鼠分为三组，每组10只，空白对照组经尾缘静脉注射生理盐水，单纯磁阿霉素组和磁阿霉素加磁场组分别注射载阿霉素金磁复合微粒溶液，其中，磁阿霉素加磁场组外加5000Gs磁场固定1h，然后处死全部小鼠，心脏取血并收集心、肝、肾、肿瘤组织，应用高相液相色谱法测定各组织中阿霉素浓度，评价其在小鼠体内靶向分布特性。结果肿瘤靶区应用外磁场固定后，肿瘤组织中药物浓度远高于非磁区其他组织中药物浓度（P0.05）。而在没有外磁场的环境下，药物在全身各组

2、织中呈弥散性分布，且肝脏和肿瘤组织中药物浓度较高。结论磁导靶向给药具有良好的靶向定位作用，有望成为一种新的化疗药物剂型用于肿瘤的靶向治疗。[关键词]磁导靶向给药；肝细胞癌；阿霉素；金磁复合微粒[中图分类号]R73-36[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2013）12（a）-0007-035化疗是临床治疗恶性肿瘤的重要手段之一，但常规给药方法却存在着毒副作用大、选择性差和药物很难在肿瘤部位达到理想的浓度等缺陷，使其临床应用受到很大限制并严重影响治疗效果。如何通过改变药物剂型和在体内的分布，能在选择性杀死肿瘤细胞的同时降低药物毒副作用，是近年来国内外学者都在致力于研究的磁导靶向

3、给药新方法[1-3]，该方法是将化疗药物和磁纳米材料制成稳定的具有磁响应性药物，然后再借助外磁场的作用选择性将药物控制在肿瘤靶区，从而显著提高肿瘤组织中的药物浓度，达到定向、高效、低毒的抗肿瘤作用[4-8]。本文通过选用载阿霉素金磁复合微粒联合外磁场，对其在荷瘤小鼠体内靶向分布特性进行考察与分析，现将结果报道如下：1材料与方法1.1实验材料1.1.1试剂阿霉素（DOX，北京华锋有限公司产品）；纳米金磁复合微粒（30nm，西安金磁纳米生物技术有限公司产品）；载阿霉素金磁复合微粒（载药量10.12%）；阿霉素标准储备液；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；液氮等。1.1.2仪器5高效液相色谱工作

4、站（日本岛津公司产品）；低温冰箱（德国Siemens公司产品）；台式微量离心机（德国Thermo公司产品）；G328型分析天平（上海上平仪器公司产品）；铆铁硼稀土永久磁铁（规格5000Gs、直径1cm、高1cm，西安金磁纳米生物技术有限公司产品）；其他：微量移液器、游标卡尺、外科手术器械、液氮储备罐等。1.1.3实验动物昆明种小鼠30只，体重22g左右，雌雄半各，由大连医科大学实验动物中心提供。1.2实验方法1.2.1小鼠肝细胞癌模型的建立专业饲养昆明小鼠，无菌操作，取肝细胞癌小鼠腹水中指数增值期的肝癌细胞（Bel-7402），用生理盐水稀释至l×107/mL，按0.15mL/只接种至小

5、鼠腋部皮下。正常条件下饲养，1周后用游标卡尺测量瘤体直径，达到1.0cm左右即可用于实验。1.2.2体内靶向分布特性实验挑选肿瘤大小均一的荷瘤小鼠30只，随机分为3组，每组10只。空白对照组经尾静脉注射生理盐水0.15mL，单纯磁阿霉素组经尾缘静脉注射载阿霉素金磁复合微粒溶液0.15mL（10mg/mL，相当于阿霉素0.82mg/mL），磁阿霉素加磁场组经尾缘静脉注射与单纯磁阿霉素组同等剂量载阿霉素金磁复合微粒溶液，注射后即刻用戊巴比妥钠麻醉并在体外肿瘤部位施加磁场固定1h，然后处死各组小鼠，心脏取血并收集心、肝、肾、肿瘤组织，液氮保存。51.2.3高效液相色谱法测定血浆、主要器官和肿瘤

6、组织中阿霉素含量1.2.3.1色谱条件Inertsil@ODS-SP（150mm×4.6mm，5μm）色谱柱；柱温25℃；流动相乙腈-0.1%乙酸（28∶72，v/v）；流速0.8mL/mim；进样量50μL；检测波长254nm。1.2.3.2阿霉素标准储备液200μg/mL甲醇标准储备液，4℃保存。1.2.3.3血浆和组织液标准曲线的制备标准储备液用甲醇稀释成100、10、1、0.5、0.1、0.05μg/L的标准阿霉素应用液各50μL。在150μL空白血浆或空白组织提取液中加入阿霉素标准应用液，配制成标准溶液，经柱前预处理后，应用高效液相色谱仪进行检测。以峰面积积分值（AUC）为纵坐

7、标（Y），阿霉素浓度为横坐标（X），绘制标准曲线，得回归方程。回归方程为：Y=27697X+5756.8，R2=0.9995。样品浓度线性范围为50～1000ng/mL，最低检测限为5ng/mL（S/N=3）。1.2.3.4样品的预处理及检测血浆样品的处理：取待测血浆200μL，加入甲醇200μL，混匀；色谱前预处理，取50μL色谱检测。组织样品的处理：取待检组织称重后，研磨成粉，加入组织质量的4倍生理盐水溶解。取组织匀浆200μL