分子生物学实验技术教学大纲

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1、分子生物学实验技术教学大纲课程名称：分子生物学实验技术课程编码： 04310107英文名称：Molecularbiologyexperiment学时：36学分：1.5适用专业：生物技术、生物工程课程类别：必修课程性质：专业基础课先修课程：《无机及分析化学》、《普通生物学》、《细胞生物学》、《生物化学》等教材：分子生物学实验技术自编讲义一、制定本大纲的依据本实验课程是专为食品科学与生物工程学院生物技术专业开设的一门专业实验技术课，本实验课在本专业人才培养中起着及其重要的地位和作用，它是培养学生今后从事教学科研及技术开发工作最重要的教学实验环节之一，

2、本课程具有知识面宽、实验性强、精密仪器使用多之特点，其目的是使本科生在参加工作和进入攻读硕士之前，对已学课程尤其是现代实验技术手段从理论上有更深的理解，对染色体DNA的提取、琼脂糖凝胶电泳检测DNA、质粒DNA的提取和酶切、PCR基因扩增、大肠杆菌感受态细胞的制备及转化和DNA重组等方面以及大型精密仪器的操作使用有进一步了解和掌握，提高学生的动手能力，为其今后从事教学、科研工作打下坚实的理论基础和实际操作能力。针对学生的培养方向，本课程以培养学生掌握生物技术与分子生物学研究的基础实验技能为主要目标，力图最大限度地利用我校现有的实验条件，使学生通过

3、本课程的学习和实践，接触和掌握从事生物技术研究所必要的实验手段。通过有限的实验室实践，涵盖分子生物学各个方面的实验内容，以点带面，突出重点，促进学生对分子生物学课程学习内容的理解和掌握。二、本实验课程的具体安排实验项目的设置及学时分配序号实验项目名称内容简介（50字左右）实验学时实验要求实验类型实验类别每组人数实验一植物染色体DNA的提取和纯度鉴定提取染色体DNA，进行纯度测定6必修综合专业45实验二质粒DNA的提取、酶切碱裂解法提取质粒，并用限制性内切酶酶解DNA，进行琼脂糖电泳6必修综合专业4实验三琼脂糖凝胶电泳检测DNA琼脂糖凝胶电泳分离不

4、同DNA样品6必修综合专业4实验四大肠杆菌感受态细胞的制备及转化制备大肠杆菌感受态细胞，转化观察6必修综合专业4实验五PCR基因扩增利用PCR技术扩增基因，并用电泳检测扩增结果。6必修综合专业4实验六DNA重组制备质粒DNA，进行DNA重组，制备感受态细胞，鉴定重组子。6必修综合专业4三、本实验课在该课程体系中的地位与作用《分子生物学》是新兴的学科，无论对基础理论研究，还是生产实践都将产生巨大的影响。《分子生物学实验技术》是这门学科的重要基础，是一门实践性很强的实验课程。掌握和应用分子生物学实验技能，是学好这一课程的必要条件。该课程不仅是《分子生

5、物学》教学重要的组成部分，而且在培养学生分析和解决问题的能力，严谨的科学态度和独立工作的能力方面，有着不可替代的作用。四、学生应达到的实验能力与标准《分子生物学实验技术》课程的设立为系统培养学生在分子生物学领域基本技术和技能，通过学生的独立实验设计和实践，培养学生的创新思维和独立分析问题、解决问题的能力。本课程实验技术原理采取以学生自习为主，课堂进行提要式的提示讲解和必要的答疑的方式，使学生掌握实验方法的基本原理和应用范围。本课程强调实验技能训练的重要性，主要课时安排学生实验，以便尽量提高学时利用率。为了节省基础设施投资，提高仪器利用率，本课程采

6、取开放式集中实验的方式，要求学生在实施实验之前，必须做好预习准备，拟好实验方案，经任课教师认可后，方可进入实验室做实验。课堂讲授与实验课的比例为１：10。在课程成绩评定上，强调平时和考试并重，基础理论和实验技能相结合的综合评定方式。五、讲授实验的基本理论与实验技术知识：实验一：植物染色体DNA的提取和纯度鉴定基本内容：采用SDS裂解细胞膜，使脱氧核糖核蛋白复合物（DNP）解聚，并用苯酚抽提法去除蛋白，从而提取染色体DNA。并对其纯度进行鉴定基本要求：掌握提取真核细胞染色体DNA的一种基本方法，5学习使用紫外线分光法评估DNA的含量和纯度基本仪器设

7、备：台式高速离心机、塑料离心管、Unico紫外可见分光光度计基本耗材：丙酮、乙醚、95%乙醇、10%次氯酸钠、抽提液（2MNaCl---1mMEDTA）、10%SDS液、氯仿—异戊醇、70%乙醇、TE缓冲液、SS苯酚实验二、质粒DNA的提取、酶切基本内容：培养细菌，利用碱裂解法提取质粒，并用限制性内切酶酶解DNA，进行琼脂糖电泳。基本要求：通过本部分实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。学习运用琼脂糖电泳检测DNA的方法和技术，初步了解限制性内切酶酶解DNA的方法。基本仪器设备：恒温培养箱、恒温摇床、台式离心机、高压灭菌锅、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外透射

8、反射仪基本耗材：葡萄糖、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸、氢氧化钠、乙酸钾、冰乙酸、氯仿、乙醇、SDS、胰RNA酶、氨苄青霉素