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1、《分子生物学实验技术》教学大纲课程编号：01.213.7.1课程名称：分子生物学实验技术（又名“分子生物学技术在中医药研究中的应用”）Molecularbiologicaltechnique开课（二级）学院：基础医学院课程性质：必修课学分：2学时：28学时课时分配教学内容讲课时数实验内容实验时数绪论重组质粒的方法与原理质粒转化大肠杆菌的方法与原理3重组质粒质粒转化大肠杆菌3阳性单菌落扩增与小量质粒制备的方法与原理2阳性单菌落扩增小量质粒制备6酶切重组质粒、电泳分离所插入的DNA、从凝胶中回收DNA的方
2、法与原理2酶切重组质粒电泳分离所插入的DNA从凝胶中回收DNA6Northernblot的方法与原理基因芯片、RACEPCR等分子生物学技术介绍3Northernblot实验录象观摩3*本课程学时为28学时，其中课堂讲授10学时，实验学时18学时。本课程在教学实践中，分别尝试过48学时和56学时。前期课程：中医基础理论，生物化学授课对象：七年制中医基础专业考核方式：考核：3次实验课实验报告分别占20％、20％、30％，研究态度占30％。课程简介：本课程属于基本实验技能培训范畴。主要内容包括：重组质粒，
3、质粒转化大肠杆菌，鉴定，阳性克隆扩增，少量质粒制备；酶切质粒，电泳鉴定，从凝胶中回收DNA等。以及部分示教和理论课介绍：涉及基因组DNA提取、Southernblot、PCR、点突变PCR、DNA双脱氧链终止法测序，mRNA的分离、Northernblot、RTPCR、原位杂交、cDNAArray和MicroArray、DDPCR、cDNA库建立、基因全序列cDNA库筛选、RACEPCR；Westernblot、ELISA、免疫组织化学、单克隆抗体制备技术、双向等电聚焦凝胶电泳，报道基因、基因功能检测
4、、Footprint、凝胶阻滞分析等。Thecourseconcentratestoculturesomeexperimentaltechnicalskill.Themaincontentsare:recombinantplasmid,invertingplasmidtobacilluscoli,assessment,masculineclonalexpansion,preparingsmallplasmid.Enzymecuttingplasmid,electrophoresisassessment
5、,reclaimingDNAfromgel.Inthemeanwhile,wesetupsomedemonstrationsandtheoreticalintroduction:theDNAextractionofgenome,Southernblot,PCR,pointmutationPCR,DNAsequencingwithdideoxychaintermination,separatingofmRNA,Northernblot,RTPCR,hybridizationinsitu,cDNAArra
6、y,MicroArray,DDPCR,establishmentofcDNAlibrary,screeninggenecompletesequencecDNAlibrary,RACEPCR,Westernblot,ELISA,immunohistochemistry,preparationofmonoclonalantibody,two-wayequal-electrofocusinggelelectrophoresis,reportergene,genefunctiondetection,Footp
7、rint,gelretardationassay,andsoon.一、前言[课程目的]了解在中医药研究和发展过程中采用分子生物学技术的重要性，以及该领域常用方法及其应用，掌握一些常用基本技术。[教学要求]了解在中医药研究和发展过程中采用分子生物学技术的重要性。了解分子生物学技术在中医药研究中应用的现况与常用方法。掌握重组质粒、质粒转化、小量质粒制备、酶切DNA，DNA电泳，凝胶中回收DNA，真核细胞RNA提取、RTPCR等一些基本技术。了解基因组DNA提取、Southernblot、PCR、点突变PC
8、R、DNA双脱氧链终止法测序，mRNA的分离、Northernblot、RTPCR、原位杂交、cDNAArray和MicroArray、DDPCR、cDNA库建立、基因全序列cDNA库筛选、RACEPCR，Westernblot、ELISA、免疫组织化学、单克隆抗体制备技术、双向等电聚焦凝胶电泳；报道基因、基因功能检测、Footprint、凝胶阻滞分析等实验技术。二、教学要求和内容、方法第一章绪论[目的要求]要求了解分子生物学常用技术的沿革、任务和在中医
