公共卫生微生物采样检测方法总结.docx

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1、【公共卫生微生物采样.检测方法总结】水中微生物检测方法　　一、空气中微生物的检测方法------细菌总数　　1.两种方法　　撞击法　　自然沉降法　　采样：梅花布点，高度：~；离墙：1m。　　二、茶具微生物检验方法　　细菌总数　　1、生理盐水的制法：将氯化钠溶解于蒸馏水中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。　　2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈，用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。　　3、检验程序：　　检样→

2、各1mL加入两块灭菌平皿→37℃，48h培养→菌落计数→报告　　4、单位：cfu/cm2。　　大肠菌群　　1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液　　2、检测方法：发酵法　　3、检样　　4、革兰氏染色过程：　　初染：1min，水洗；　　碘染：1min，水洗；　　脱色：30s，水洗；　　复染：1min，水洗，待干，镜检。　　5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。　　三、毛巾、床上卧具微生物检测方法　　细菌总数　　1.采样　　毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2

3、；　　床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；　　2、检测程序同茶具细菌总数检测　　3.计算单位：cfu/25cm2。　　大肠菌群　　1.涂抹法：　　四、理发用具微生物检验方法　　大肠菌群　　1、采样　　推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；　　理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。　　2、检样5mL倒入双料乳糖胆盐发酵管，37℃，24h培养；　　3、分离培养：接种伊红美蓝平板，做革兰氏染色镜检；　　4、证实试验：接种乳糖发酵管37℃，24h培养，

4、观察产气情况。　　5、结果报告：乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，可报告为大肠菌群阳性。　　金黄色葡萄球菌　　1、培养基：%的氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤培养基　　2、步骤：　　做大肠菌群剩余的5mL倒入培养基中，37℃，24h培养；　　接种血平板，37℃，24h培养；观察形状：圆形、金黄色、凸起、表面光滑、周围有溶血圈；　　挑菌落做镜检：革兰氏阳性，葡萄状排列；　　甘露醇发酵试验：接种到甘露醇发酵培养基中，37℃，24h培养，观察是否产酸；　　血浆凝固酶试验　　玻片法：在干净的玻片两边，一

5、端滴一滴生理盐水，一端滴一滴血浆，接种环挑菌落分别与它们混合。5min后均无凝固现象的为阴性；若血浆中出现颗粒状凝块而生理盐水中没有，则为阳性。　　五、拖鞋微生物检验方法　　霉菌与酵母菌　　1.培养基：霉菌培养基、孟加拉红培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基　　2.取样：有棉拭子在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处的5cm×5cm面积上均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品；　　3.将盛有棉拭子的试管在手心用力振荡100次，使霉菌孢子分开；　　4.培养：在霉菌培养箱中25~28℃，培养观察一周。　　5.单位是cfu/50cm2

6、。　　六、浴盆、脸盆微生物检测　　细菌总数　　无菌生理盐水：分装125mL/瓶供浴盆采样；50mL供脸盆采样。采样部位：在盆内侧二分之一到三分之一高度；　　布点：浴盆梅花布点；脸盆相对两侧壁布点；　　方法：涂抹法　　单位：cfu/25cm2。　　大肠菌群　　七、游泳池水微生物检测　　、细菌总数　　1.采样瓶：无酸、无碱、无毒的玻璃容器。　　2.灭菌前要加入足量的10%的硫代硫酸钠溶液，一般125mL水样加。　　3.采样　　4.操作步骤　　大肠菌群　　1.培养基：三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液　　2.步骤　　推测

7、性试验　　2个装有50mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的大试管内各加入100mL的水样；在10支装有5mL三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管里加入10mL水样。摇匀，培养。　　平板分离　　接种伊红美蓝，培养、观察；典型菌落形态：黑紫色或红紫色，具有金属光泽。　　复发酵试验　　进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，培养，观察。　　查表：1000mL水样中大肠菌群的MPN值。　　八、生活饮用水微生物检验方法　　采样　　1.采样容器应采用洁净、无色、无毒的聚乙烯塑料和硬质玻璃。样品瓶必须专瓶专用，切不可用实验室盛装过浓溶

8、液的瓶作采样瓶。通常我们使用500ml的高压灭菌的细口瓶采样。　　2.容器及瓶塞、瓶盖应能经受灭菌的温度。　　3.检验中所用的一切用品必须是完全灭菌的。在灭菌前应彻底洗涤干净，121℃高压蒸汽灭菌20min，或160℃干烤2h。　　4.冷藏，4h内检测。如有游离余氯应在采样瓶消毒前每125ml加硫代硫酸钠溶液。　　细菌总数　　总大肠菌群　　1.乳糖发酵试验　　10mL水样加入10mL双料乳糖发酵管中；1mL水样加入10mL单料