植物组织培养课件PPT培养基及其配制上课讲义.ppt

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1、植物组织培养课件PPT培养基及其配制一、培养基的种类最早的培养基:是Sacks(1680)和Knop(1681)，根据植物从土中主要是吸收无机盐营养，设计出了由无机盐组成的Sacks和Knop溶液.常用的培养基及特点如下：(1)MS培养基1962年，Murashige和Skoog，培养烟草细胞。特点：无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液；硝酸盐含量较其他培养基为高；应用广泛—基本培养基。(2)B5培养基1968年，Gamborg等，培养大豆根细胞。特点：含有较低的铵，对有些植物的生长有抑制作用；适宜于双子叶植物特别是木本植物。(3)Whi

2、te培养基1943年，White，培养番茄根尖。特点：无机盐数量较低，适于生根培养。（4）N6培养基1974年，朱至清等，水稻等禾谷类作物花药培养。特点：成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。(5)KM—8P培养基1974年，原生质体培养。特点：有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。二、培养基的成分水、无机盐、有机物、天然复合物、植物激素、培养体的支持材料、抗生素、活性炭等。（一）水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。

3、它是生命活动过程中不可缺少的物质。配制培养基母液时要用蒸馏水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质。大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。（二）无机元素(inorganicelement)大量元素：指浓度大于0.5mmol／L的元素等。其作用是：(1)N是细胞质、细胞核、生物膜等的组成成分，是生命不可缺少的物质。供应形式：NO3—N、NH4—N。NH4—N对植物生长较为有利。供应物质：KNO3、NH4NO3、K2SO4、氨基酸等。(2)P是磷脂的主要成分。参与生物膜、核酸、ATP、AD

4、P等的组成。供应形式：磷酸二氢根、磷酸氢根供应物质：KH2P04或NaH2P04等。在植物组织培养过程中，向培养基内添加磷，不仅增加养分、提供能量，而且也促进对N的吸收，增加蛋白质在植物体中的积累。(3)K作用：对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。一般为1—3mg／L为好。供应物质：KCI、KN03等盐类提供。(4)Mg、S和CaMg-是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂；S-是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。Ca-是构成细胞壁的一种成分，Ca对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用。微量元素指小于0.5mmol／L的元素，Fe，B

5、，Mn，Zn、Cu，Mo，Co等。铁-是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分；是叶绿素形成的必要条件。对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用。供应物：鳌合铁（FeSO4·7H20+Na2—EDTA）在制做培养基时不用Fe2（SO4）3，和FeCl3(因其在pH值5．2以上，易形成Fe(OH)3的不溶性沉淀)。B，Mn，Zn，Cu，Mo，Co等：也是植物组织培养中不可缺少的元素，缺少这些物质会导致生长、发育异常现象。（三）有机化合物(organiccompound)培养基中若只含有大量元素与微量元素，常称为基本培养基（basic

6、medium)。为不同的培养目的往往要加入一些有机物以利于快速生长。常加入的有机成分主要有以下几类：碳水化合物最常用的碳源是蔗糖，葡萄糖和果糖也是较好的碳源。麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在组织培养中也有应用。——蔗糖使用浓度在2%—5%，常用3%，即配制一升培养基称取30g蔗糖。——高压灭菌时，一部分糖会发生分解，制定配方时要给予考虑。在大规模生产时，可用食用的绵白糖代替。维生素(vitamin)以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长、分化等有很好的促进作用。VBl(盐酸硫胺素)：对愈伤组织的产生和生活力有重要作用。VB6(盐酸吡哆醇)：能

7、促进根的生长。Vpp(烟酸)：与植物代谢和胚的发育有一定关系。Vc（抗坏血酸）：有防止组织变褐的作用。(酚类物质-醌)一般用量：0．1—1．0mg／L。有时用量较高。有时还使用生物素、叶酸、VB12等。肌醇(myo—inosltol)又叫环己六醇作用：能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用。对细胞壁的形成也有作用。使用浓度：一般为lOOmg／L，氨基酸(alminoacide)是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。常用的氨基酸：甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。

8、水解乳蛋白或水解酪蛋白：它们是牛乳用酶法等加工的水解产物，是含有约20种氨基酸的混合物，用量在10-1000mg／L之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。如在培养中