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时间:2018-10-03
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1、植物组培基本操作图解植物组织培养的内容植物组织培养包括以植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体为外植体的离体无菌培养,拥有几种不同水平的培养技术,即整体的、器官的、组织的、细胞和原生质的培养技术。(植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养)植物组织培养中的重要概念愈伤组织:指由植物的一种组织或器官经历脱分化形成的原始胚样组织,它具有再分化成为完整植物体的潜能;外植体:植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等;无菌和消毒:无菌操作要注意:每次操作前,将双手用酒精棉球擦拭消毒;解剖针、解剖刀等金属工具用火焰烧过灭菌,在酒精中冷却,再将酒
2、精烧去方可使用;尽量减少无菌三角瓶和培养皿在空气中的暴露时间;所有无菌操作尽量快速完成,并请在酒精灯附近进行。组培实验用品一、无菌苗的快速切繁1、点着酒精灯,双手擦拭消毒,打开长有无菌苗的三角瓶,三角瓶瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过灭菌。2、用灭菌的镊子轻轻捏出幼苗,放在无菌的培养皿中,用灭菌的剪刀将主茎剪成若干0.5-1cm的小段,要求每段至少包含一个生长点,接入盛有MS培养基的三角瓶中,每一个切段必须直接接触培养基,三角瓶口重新烧过灭菌,并重新封好。3、在光照培养箱中,25℃,16小时光照条件下培养4周,可长成完整植株。1、点着酒精灯2、双手擦拭消毒3、剪刀灭菌外焰4、酒精中冷却5、把
3、酒精烧去6、打开三角瓶——铝箔纸的拿法a8、瓶口在火焰上烧过9、铝箔纸的放法11、镊出苗12、放入培养皿中13、幼苗形态——生长点14、剪取茎段15、剪好的苗培养皿的拿法16、茎段接种a17、茎段接种b18、接种好的苗a19、接种好的苗b20、重新封好瓶口a21、重新封好瓶口b22、重新封好瓶口c二愈伤组织的培养1、挑选生长健康的无菌叶或茎,在灭菌的培养皿中→剪成0.5-1cm2的小块或相当大小的茎段(造成伤口),→接种在盛有MS培养基的培养皿中→将培养皿用封口膜封住。2、在光照培养箱中,25℃下,16小时光照,培养两周,可形成愈伤组织。1、将苗剪出伤口2、剪好的叶片和茎段3、打开培养皿5、
4、愈伤组织接种6、培养皿封口三、苗的茎尖培养1、取幼苗10株,剪取1cm左右的茎尖→浸入70%的酒精1分钟→消毒液中15分钟→无菌水冲洗5次→灭菌的滤纸上吸干→放入灭菌的培养皿。2、在双目解剖镜下,用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥,挑取带着两至三个叶原基的生长锥。移到盛有B5培养基的培育皿中,诱导愈伤组织形成,用封口膜将培养皿封好。3、在恒温培养箱中,26℃下,培养六周,可形成簇生芽丛。1、幼苗形态2、剪取茎尖茎尖3、剪好的茎尖4、倒入70%酒精处理1分钟5、倒去酒精6、倒入消毒液(一般为升汞)处理15分钟7、倒去消毒液8、无菌水冲洗5次9、取出茎尖10、在滤纸上吸干水分11、双目解剖镜下解剖
5、茎尖显微解剖镜使用图解目镜放大倍数旋钮物镜解剖载物台焦距旋钮底光源开关上光源调节旋钮
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