工业微生物产生菌的分离筛选讲课讲稿.ppt

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1、工业微生物产生菌的分离筛选菌株分离（separation）就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开，并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选，进而得到所需的微生物的过程。工业微生物产生菌的筛选一般包括两大部分：一是从自然界分离所需要的菌株，二是把分离到的野生型菌株进一步纯化并进行代谢产物鉴别。菌种是发酵工业的关键菌种可从以下几个途径进行收集和筛选：（1）向菌种保藏机构和个人索取有关的菌株，从中筛选所需菌株。国际承认的培养物保藏单位保藏单位(简称)所在国家    保藏范围澳大利亚

2、国家分析试验室(AGAL)澳大利亚    微生物菌种比利时微生物保藏中心(BCCM)比利时    大部分微生物菌种保加利亚菌种保藏库(NBIMCC)保加利亚    微生物菌种中国典型培养物保藏中心(CCTCC)中国    几乎所有的培养物中国普通微生物菌种保藏中心(CGMCC)中国    普通菌种捷克微生物保藏所(CCM)捷克    普通微生物菌种法国微生物保藏中心(CNCM)法国   几乎所有的培养物德国微生物保藏中心(DSM)德国    普通微生物菌种匈牙利国家农业和工业微生物保藏中心(NCAIM)匈牙利

3、    工业菌种日本国家生命科学和人类技术研究所(NIBH)日本    几乎所有的培养物荷兰真菌保藏所(CBS)荷兰    真菌类韩国细胞系研究联盟(KCLRF)韩国    动植物细胞系韩国微生物保藏中心(KCCM)韩国    微生物菌种韩国典型培养物保藏中心(KCTC)韩国    培养物俄罗斯微生物保藏中心(VKM)俄罗斯    工业微生物俄罗斯科学院微生物理化所(IBFMVKM)俄罗斯    所有培养物俄罗斯国家工业微生物保藏中心(VKPM)俄罗斯    工业菌种斯洛伐克酵母保存所(CCY)斯洛伐克  

4、  酵母菌西班牙普通微生物保藏中心(CECT)西班牙    普通微生物菌种英国藻类和原生物动物保藏中心(CCAP)英国    藻类、原生动物欧洲动物细胞保藏中心(ECACC)英国    动物细胞系等国际真菌学研究所(IMI)英国    真菌、细菌等英国国家食品细胞保藏中心(NCFB)英国    工业细菌英国国家典型培养物保藏中心(NCTC)英国    普通微生物英国国家酵母菌保藏中心(NCYC)英国    酵母菌英国国家工业和海洋细菌保藏中心(NCIMB)英国    工业及海洋细菌美国北方农业研究所培养

5、物保藏中心(NRRL)美国    以微生物菌种为主美国典型培养物保藏中心(ATCC)美国    几乎所有的培养物（2）由自然界采集样品，如土壤、水、动植物体等，从中进行分离筛选。（3）从一些发酵制品中分离目的菌株。菌株的分离和筛选一般可分以下几个步骤:采样富集分离产物鉴别生化鉴定第一节含微生物样品的采集一、从土壤中采样1克土壤的含菌量大体有如下的递减规律：细菌（108）＞放线菌（107）＞霉菌（106）＞酵母菌（105）＞藻类（104）＞原生动物（103）（一）根据土壤特点1．土壤有机质含量和通气状况耕作土、菜园土、近

6、郊土壤，森林土，贫瘠土壤土样最好的土层是5-25cm、一般每克土中含菌数约几十万到几十亿个，并且各种类型的细菌和放线菌几乎都能分离到。总的来说酵母菌分布土层最浅，约5-10cm；霉菌和好氧芽孢杆菌也分布在浅土层。厌氧菌分布较深。2．土壤的酸碱度和植被状况3．地理条件：南方、北方4．季节条件：7—10个月（二）采样方法用取样铲，将表层5cm左右的浮土除去，取5-25cm处的土样10～25g，装入事先准准备好的塑料袋内扎好。给塑料袋编号并记录地点、土壤土质、植被名称、时间及其他环境条件。北方土壤干燥．在10-30cm处取样。

7、一般样品取回后应马上分离，以免微生物死亡。样品较多时，可先采用选择性培养基做好试管斜面，随身带走。二、根据微生物生理特点取样1．根据微生物的营养类型每种微生物对碳、氮源的需求不一样，分布也有差异。若需要筛选代谢合成某种化合物的微生物，从大量使用、生产或处理这种化合物的工厂附近采集样品，容易得到满意的效果。森林、肉类加工厂、面粉厂、糖厂、柑橘、油田、化工厂等不少微生物对碳源的利用是不完全专一的，如以油脂为碳源的某些脂肪酶产生菌同样也可以分解淀粉获得能源而生长。2.根据微生物的生理特性高温、低温、耐压、耐高渗等三、特殊环境

8、下采样1．局部环境条件的影响2．极端环境条件的影响特定微生物的分离嗜极菌嗜压、嗜酸嗜减一、控制培养基的营养成分1根据环境条件选择合适的培养基2、根据微生物的类型3、根据微生物对环境的耐受范围具有可塑性的特点(抗性菌株、污染物分解菌）第二节含微生物样品的富集培养富集培养（enrichmentbreeding)：是在目的