尿素的细菌;纤维素微生物的分离选编课件复习进程.ppt

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1、尿素的细菌;纤维素微生物的分离选编课件生物分类动物界：植物界：真菌界：原生生物：原核生物：病毒大型真菌、霉菌酵母菌细菌、放线菌、支原体、蓝藻、衣原体变形虫、草履虫DNA型病毒、RNA型病毒真核生物原核生物非细胞生物细胞生物二、微生物培养：1）概念：按照微生物对营养物质的不同需要，配制出供其生长繁殖的营养基质。1、培养基：2）营养成分：概念分类作用为微生物的生长和繁殖提供所需碳元素的营养物质无机碳源：二氧化碳、碳酸氢钠；有机碳源：葡萄糖、脂肪酸、石油等葡萄糖是最主要的碳源合成微生物的细胞物质和代谢产物，有些碳源是异养

2、微生物主要能源碳源：概念分类作用为微生物的生长和繁殖提供所需氮元素的营养物质无机氮源：N2、NH3铵盐、硝酸盐；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等铵盐、硝酸盐是最主要的氮源。合成蛋白质、核酸和含氮代谢产物氮源：温度、PH、渗透压、O2及特殊营养物质等。1、科学家们用脉胞霉（一种真菌）为材料，进行科学研究，用基本培养基来培养脉胞霉。基本培养基中所含的营养要素一般包括：_______________________________2、酵母菌可用于食品工业的废水处理，废水中的淀粉或废糖可与为酵母菌的生长提供________

3、类营养物质。3、用乳酸菌制酸奶，加入的蔗糖是作为______类营养物质加入到牛奶中的。4、硝化细菌的碳源、氮源、能源依次为__________________________________。碳源、氮源、水、无机盐碳源碳源CO2、NH3、NH3氧化释放的化学能选择培养基1）不加碳源的培养基分离自养型微生物2）不加氮源的培养基分离固氮菌3）加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌4）加入高浓度食盐的培养基分离金黄色葡萄球菌思考：自然界中微生物是混杂的生活在一起的，如何分离出某种微生物（如纯化大肠杆菌）？2、实验操作—

4、—大肠杆菌的纯化培养1）制备培养基：计算称量溶化调PH值灭菌倒平板？原则：目的明确、营养协调、PH值适宜无菌技术1、获取纯化培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。2、无菌措施：1)对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒；对将培养用的器皿、接种工具和培养基进行灭菌2)实验操作时已灭菌材料等应避免与周围物品接触；实验操作应在酒精灯火焰附近进行；接种工具等应在酒精等火焰上灼烧后使用概念对象常用方法消毒灭菌用温和物理和化学方法杀死物体表面或内部部分有害微生物（不包括芽孢和孢子）用强烈物理和化学方法杀死物体表面或内部全部有

5、害微生物（包括芽孢和孢子）空间、操作者衣物、手等器皿、培养基、接种工具等煮沸、酒精、氯气、紫外线等灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法消毒：常用消毒方法：煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min；巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min；化学药剂消毒法:用75%酒精等进行皮肤消毒;氯气消毒水源；紫外线消毒等灼烧灭菌干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。高压蒸汽灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.2)灭菌方法：倒平板：待培养基冷却到50OC左右时倒平板。平板倒置原因：防止培养基冷

6、却产生水滴滴落培养基上，造成污染。2）纯化大肠杆菌：微生物接种方法平板划线法稀释涂布平板法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的细胞群体，即得到单一菌落。平板划线法稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释梯度菌液分别涂布在固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，进而形成单个菌落。步骤1：梯度稀释操作123456(1)将分别盛有9mL水的试管灭

7、菌并编号。(2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。(3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。步骤2：涂布到培养基上10-110-410-510-6平板划线法稀释涂布平板法相同点：分散出单细菌形成单菌落来分离菌种不同点：分别通过划线和稀释分散出单细菌，稀释涂布平板法除分离菌种外还可以对微生物计数专题1微生物专题微生物概念及分类微生物培养微生物分离和计数微生物应用思考1：如何寻找某种微生物？思考2：如何分离某种微生物？取

8、土样制土壤悬液样品稀释涂布于固体培养基挑菌落保存选择培养筛选并增大菌种浓度稀释菌种1、活菌计数法（通过统计菌落估算活菌数）原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。常用方法：稀释涂布平板法。每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平