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时间:2020-03-13
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1、专题二微生物的培养与应用课题3分解纤维素的微生物的分离1㈠纤维素与纤维素酶1.纤维素纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。一、基础知识23清除肠道内毒素物质,将各种毒素吸附、稀释、包裹,并促进其迅速排除体外,有肠道清道夫的美称。平衡膳食结构促进胃肠吸收水份,延缓葡萄糖的吸收,改善耐糖量,是糖尿病人的理想食品。4谁需要纤维素日常饮食中全谷类食物、新鲜蔬菜、水果不足者;希望增加膳食纤维摄取者5特别适合人群中老年:易患高血压、便秘爱美人士:帮助控制体重,保持最佳身材糖尿病、冠心病、高血脂症的预防6阅读课本27页基础知识部分第一、二段,回答
2、下列问题:1.纤维素在生物圈的分布状况?纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。一、纤维素和纤维素酶7思考:纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨,但却不会在地球上大量的积累,为什么?纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们能够产生纤维素酶。8纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维
3、素2.纤维素酶的组成及作用?93、纤维素的分解能分解纤维素的微生物有各种细菌、真菌和少数放线菌。方法:滤纸崩溃法4、纤维素酶活性的测定实验:10①取二支20mL的试管纤维素酶分解纤维素的实验②各加入一张滤纸条③各加入pH4.8,物质量为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液11ml和10ml甲乙④在乙试管中加入1mL纤维素酶⑤两支试管固定在锥形瓶中,放在140r/min的摇床上振荡1h⑥结果:乙试管的滤纸条消失讨论:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是什么?1112本实验的自变量是纤维素酶的有无,自变量的操纵方法是:在一支试管中添加适量(1mL)的纤维素酶溶液,在
4、另一支试管不添加纤维素酶,但需加入等量的缓冲液,不能加入蒸馏水,否则会影响溶液的pH。实验分析:P27的小实验是如何构成对照的?13下列生物能分解纤维素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C14刚果红染色法刚果红能与纤维素形成红色复合物,而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。(二)纤维素分解菌的筛选当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,这样我们就可以通过是否产生透明圈来
5、筛选纤维素分解菌。1516练一练:1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是()A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖D172.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是()A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈,则说明已筛 选出了纤维素分解菌B18二、实验设计土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落19思考:本实验的流程与课
6、题2中的实验流程有哪些异同?本实验流程与课题2的流程的区别如下:课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。本课题通过选择培养,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。20土壤取样①取样环境富含纤维素的环境中由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。②原因21土壤取样③实例:树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等。④讨论:如果找不到合适的环境,可将滤纸埋在土壤中,将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认
7、为滤纸应埋进土壤中多深?将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。222、选择培养增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离所需要的微生物。①目的:说明:分析“纤维素分解菌的选择培养基配方”可知,该配方中的酵母膏也能够提供少量的碳源,因此其他微生物也能在该培养基中生长繁殖。只不过,由于酵母膏的含量极少,因此,只有以纤维素为碳源的微生物才能大量繁殖。23培养基成分分析培养基组成提供主要的营养物质纤维素粉5g碳源(能源)NaNO31g氮源、无机盐KCl0.5gNa2
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