第六章-园林苗圃育苗新技术ppt课件.ppt

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1、第六章园林苗圃育苗新技术一、组织培养育苗技术植物组织培养是植物繁殖的新技术。是利用植物的根、茎、叶、花、果、茎尖、种子、胚甚至细胞，在无菌条件下，给以适当的营养、温度、湿度、光照、激素等条件，使植物组织再生的技术。.（一）组培育苗的优缺点优点：1、保持母树的优良特性；2、无性系快速大量地繁殖；3、茎尖脱毒培养脱毒苗；4、速度快、省时间、产量大；5、培育新品种；6、保存种质资源。缺点：1、操作烦杂，要求有一定设备条件2、试验阶段成本较高。.（二）组织培养分类1、以所用外植体材料来分：植株培养器官培养胚胎培养组织培养细胞培养原

2、生质体的培养.（二）组织培养分类2、依所用的培养基不同来划分：固体培养液体培养静止培养、旋转培养、振荡培养.（三）植物组织培养的应用无性系的快繁脱毒苗培育.（四）组织培养的设备和条件1、实验室准备室：器具的洗涤、干燥、存放与蒸馏水的制备；培养基的配制、分装、高压灭菌；存放天平、药品及各种药品的配制等。面积在30m2左右。接种室：也称为无菌操作室。主要供材料的消毒、接种、无菌材料的继代转苗等。设备有超净工作台及无菌的接种工具。面积在20m2左右。培养室：是培养试管苗的场所。要求室温25~27ºC之间，需安装调节温度设备；将光

3、源设计在培养物的上方。培养室还要有培养装置如培养架等。.2、仪器设备及器具（1）制备培养基设备:天平、冰箱（2）灭菌设备：高压灭菌锅烘箱和恒温箱（3）接种设备：（4）培养设备：（5）璃器皿和用具：如三角瓶、量筒、烧杯等。.（四）培养基及其制备1、培养基的组成无机成分：（1）大量元素：包括N、P、K、Ca、S等元素的无机盐。需要量大，具有重要作用。（2）微量元素：Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo、Co等多种微量元素。植物生长必不可少。有机成分（3）维生素：参与酶的形成和蛋白质、脂肪的代谢等活动。（4）氨基酸：谷氨酸、甘氨酸等

4、。（5）肌醇：.（6）糖：是碳元素提供者，调节培养基的渗透压。（7）支撑物质：琼脂是常用的固化剂，它能使培养基固化。（8）植物生长调节剂；吲哚乙酸、萘乙酸等，促进细胞分裂，刺激生长。（9）水：（10）其他：活性炭.2、常用培养基MS培养基怀特培养基米勒培养基B5培养基N6培养基.3、培养基的配制技术组织培养和整体植物在营养上的主要区别是它的异养性，整体植物只需要无机营养，而组织培养则需另外供给C源和许多有机养料。各种植物以及同一植物的不同器官和材料进行培养时对无机养料的要求也略有区别，甚至在增减过程中也发生变化。因此在培养

5、过程中随着组织和细胞的分化发育的进展正确选用培养基，及时调整培养基中的某项成分(转换培养基)是成功的关键之一。.配制程序按量吸取药液混合注入蔗糖、琼脂的混合液中搅拌均匀用0.4%的NaOH或3.65%HCl溶液调节pH值装入三角瓶等培养容器内灭菌待用.4、培养材料的选择一般常用作快速繁殖的材料有鳞茎、球茎、茎段、茎尖、花柄、花瓣、叶柄、叶尖、叶片等，它们的生理状态对培养时器官的分化有很大影响。一般来讲，发育年幼的实生苗比发育年龄老的成年树容易分化，顶芽比腋芽容易分化，萌动的芽比休眠的芽容易分化，采用大树基部的萌蘖有利于芽的

6、诱导和分化。此外可以用未成熟的种子、子房、胚珠及成熟的种子为材料，剥去种皮经过胚胎培养，打破休眠得到试管苗后，再进行快速繁殖。.5、接种与培养（1）外植体的消毒与接种将接种材料用自来水冲洗干净，擦干。然后，在超净台上或接种箱内，将接种材料浸在饱和漂白粉上清液里，作表面灭菌15—30min，也可用0．1％的升汞溶液作表面灭菌8—12min。灭菌时间快到时，即倾去灭菌溶液，用无菌水涮洗多次，然后用无菌纱布吸干接种材料外部的水分，最后在无菌的条件下接种在培养基上以待器官分化。.（2）芽的分化接种后，要使材料分化出许多芽，必须对培

7、养基及激素的种类和浓度进行严格地筛选。在诱导芽的分化过程中，常用的基本培养基为MS培养基，适当降低MS培养基中无机盐的浓度，特别是降低氮素水平，对芽的分化和生长都是有利的。.激素的种类和浓度对芽的分化起着重要的作用。由于不同的植物和不同的组织器官所含的内源激素的种类和浓度不同，因而使细胞、组织、器官分化和分化所需要的激素水平也不相同。原则上讲，细胞分裂素可以促进芽的分化，常用的细胞分裂素有激动素、6·苄基腺嘌呤、玉米素和异戊烯基腺嘌呤。在快速繁殖中，一般用6—苄基腺嘌呤比激动素的效果好，合适的浓度一般为0．25mg／L。少

8、数种类的植物适合用玉米素和异戊烯基腺嘌呤。生长素虽然不能促进芽的分化，但是一般植物芽的分化需要它与细胞分裂素浓度有一定的比例。当细胞分裂素的相对含量大于生长素时，有利于芽的分化和生长，在MS培养基中，附加0．5mg／L吲哚乙酸，lmg／L6—苄基腺嘌呤，是芽分化的最佳配比。.（3）根的诱导要促使试管苗生