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时间:2019-06-24
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1、第6单元园林苗圃育苗新技术主要内容6.1组织培养技术6.2容器育苗技术6.3无土栽培技术学习目标理论知识:植物组织培养、容器育苗及无土栽培的概念、特点、分类、发展特点及应用范围等。一般技能:容器育苗中培养基质的原料来源和培养基质的配方、配制方法;无土栽培的条件和无土栽培技术。关键技能:组织培养技术操作;容器育苗的播种技术。6.1组织培养技术了解植物组织培养的概念、特点、分类、应用范围;掌握植物组织培养的条件、组织培养技术。内容组织培养概述植物组织培养的条件组织培养技术组织培养概述概念是把植物的部分器官、组织、细胞以及原生质体等,在无菌和人工控制的条件下,接种到培养基上,使之形成完整
2、植株的繁殖方法。理论基础植物细胞全能性。特点分类应用植物组织培养的特点优点繁殖系数大。半年内可由一株苗木繁殖一百万株新个体。解决常规育苗困难的问题。培育脱毒苗。培养茎尖分生组织(0.2~0.3mm),可以脱掉病毒,育出无病毒苗(又称脱毒苗)。脱毒苗抗逆性强、质优、生长旺盛。不受季节限制。一年四季均可进行,可实现工厂化育苗。利于种质资源的保存。缺点需要一定的设备条件,技术要求较高,操作人员需要专门的培训。试验阶段成本较高。植物组织培养的分类依据用做外植体的植物材料的不同来划分植株培养器官培养胚胎培养依据用做外植体的植物材料的不同来划分组织培养细胞培养原生质体培养依据用做外植体的植物材
3、料的不同来划分组织培养细胞培养原生质体培养依据所用的培养基不同来划分固体培养液体培养植物组织培养的应用无性系的快繁对于不能用普通繁殖法或用普通繁殖法繁殖太慢的植物,如兰科植物、蕨类植物和许多观叶植物,组织培养技术是实现商品化生产的最佳途径。同时,对于新育成、新引进品种、稀缺品种、濒危植物和优良单株等可扩大繁殖。一个新育成品种问世后,可在两三年内迅速推广。脱毒苗培育利用植物茎尖上病毒分布少甚至没有的特点,进行培养、增殖。使用无病毒种苗,可以减少直至杜绝病毒病的传播。植物组织培养的条件植物组织培养的生产设施实验室主要仪器设备及器材培养基培养基的基本组成组织培养的培养基种类较多,但都包括
4、无机营养、有机成分、碳素、琼脂、生长调节剂、水等。MS培养基(Murashige和Skoog,1962年)其他常用培养基环境条件实验室准备室用以进行组培时所需器具的洗涤、干燥、保存;蒸馏水的制备;培养基的配制、分装、包扎和高压消毒;处理大型植物材料,以及进行生理、生化的分析等各种操作。其要求与一般化学实验室相同。接种室(无菌室)要求室内干爽、安静,清洁明亮,保持良好的无菌和低密度有菌状态。主要用于培养材料的表面消毒、外植体的接种、无菌材料的继代转接等。培养室要求室内洁净、干燥。是进行初代、继代、生根培养的场所。主要仪器设备及器材准备室的仪器设备与器材天平、酸度计、蒸馏水器冰箱、烘箱
5、准备室的仪器设备与器材高压灭菌锅、水槽、实验台、药品柜、药品柜、玻璃器皿无菌室仪器设备与器材超净工作台、双目实体解剖镜、细菌过滤器、细菌滤膜、接种工具纯水机与蒸馏水发生器:显微镜包括解剖镜,生物显微镜,倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。酸度计:用于校正培养基和酶制剂的PH。电炉推车酒精灯封口膜接种器具灭菌器培养瓶培养室仪器设备与器材空调定时器增湿机和除湿机培养架光照培养箱摇床或旋转床日光灯培养基的基本组成无机营养大量元素一般指浓度大于0.5mmol/L,包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等。它们是植物细胞中合成核酸、蛋白质、酶系、叶绿素等必不可少的营养元素。微量
6、元素包括Fe、Cu、Mo、Na、Zn、Mn、B、Co等。它们在植物的生命活动中,多以辅基形式在酶系中起着重要的作用。在培养基中添加10-7~10-5mmol/L即可满足需要。有机成分维生素主要有维生素B1(盐酸硫胺素)、维生素B3(烟酸)、维生素B6(盐酸吡哆素)、生物素、叶酸等。它们以辅酶的形式参与酶系的活动及细胞蛋白质、脂肪、糖代谢等重要的生理活动。氨基酸主要有甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、酪氨酸、谷氨酰胺等。它们能促进不定芽、胚状体的分化。肌醇利于活性物质发挥作用并参与糖代谢,能促进培养物快速生长。植物生长调节剂常用的主要有三大类:细胞分裂素类、生长素类、赤霉素类。对不定芽、胚状体
7、、不定根等起重要作用。细胞分裂素类包括激动素(KT)、玉米素(ZT)、6-苄基氨基嘌呤(6-BA)等。其作用强弱依次是ZT>BA>KT。具有促进细胞分裂、延缓组织衰老、诱导不定芽分化等作用。生长素类包括萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、2,4-D等。其作用强弱依次是2,4-D>NAA>IBA>IAA。它们能促进不定根分化,低浓度2,4-D有利于胚状体的分化。赤霉素类通常使用赤霉酸(GA3)。它能促进已分化芽的伸长,但不利于不定芽、不定根的分化。
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