紫外分光光度法测定维生素B1片的含量.doc

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1、紫外分光光度法测定维生素B1片的含量维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。1实验装置及试剂1.1仪器BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。1.2实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：），维生

2、素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。2实验方法处方分析：组成处方量(g)比例(%)维生素B11016.39淀粉2032.78糊精3049.18硬脂酸镁1.01.639生产1000片根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约7

3、0ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（）为421计算，即得。2、方法验证2.1.线性和范围精密称取维生素B1对照品约25mg，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1250μg/ml的对照溶液。分别精密量取该溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释

4、至刻度，摇匀，即得系列浓度的对照品溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，以吸收度（A）对浓度（C）回归处理，得标准曲线和回归方程。2.2.回收试验（准确度试验）对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同2.1项下。供试品溶液的制备：精密称取维生素B1精制原料约0.25g，置50ml量瓶中，加入盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/m维生素B1溶液储备液；分别精密量取该溶液4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g，1/100天平）的100ml量瓶中（一式三份），加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇使之溶解，再加盐酸溶液（9→10

5、00）稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，摇匀，得高、中、低三种浓度的试验溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，用对照品比较法计算含量。2.3、精密度试验取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），一式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）适量，振摇15min，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B112.5ug/ml的供试品溶液。另取维生素B1对照品适量，用盐

6、酸溶液（9→1000）稀释制成12.5μg/ml的对照品溶液。照分光光度法（ChP2005二部附录IVA）在246nm处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算，即得。表1维生素B1标准曲线的制备编号12345对照液浓度7.5010.0012.5015.0017.50（ug/ml）吸光度A0.3120.3910.4800.5590.640图2维生素B1标准曲线图由图2可得，采用此法进行维生素B1含量的测定，在浓度为8.00-16.00ug/ml范围内线性关系较好（R²=0.9997）。表2维生素B1片回收率实验结果编号加入量（m

7、g）对照液浓度（ug/ml）吸光度A测得对照液浓度（ug/ml）回收率（%）110.0010.000.3709.2692.6210.0010.000.3709.2692.6310.0010.000.3709.2692.6412.5012.500.45511.8494.7512.5012.500.45611.8795.0612.5012.500.45511.8494.7715.0015.000.53914.3895.9815.0015.000.53914.3895.9915.0015.000.54114.4496.3123XRSDRSD高95.9%95.9%96.