组织培养复习试题.doc

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1、组织培养复习试题1、细胞工程的定义与特点4细胞工程(Cellengineering)是指主要以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术2、脱分化30脱分化：又称去分化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程，即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。3、植物组织培养的技术路线744、植物组织培养的常见问题与解决措施83?(1)玻璃化问题?植物组织培养中，常会出现一些半透明状的畸形试管植物

2、，这类植物体被称为“玻璃苗”，这种现象称为玻璃化现象，又称过度水化现象。?组织培养过程中试管苗的玻璃化现象主要是适应性的生理问题，是不能很好适应培养基和培养环境的结果。?(2)褐变问题?褐变可分为酶促褐变和非酶促褐变，主要是酶促褐变。?酶促褐变是由多酚氧化酶引起的。当外值体处于机械损伤等逆境时,细胞膜的结构遭到破坏，酚酶催化多酚类化合物，使其发生氧化形成棕褐色的醍类物质和水；醍类物质经过非酶促聚合，形成黑褐色物质(羟醍与黑色素等)，引起褐变的发生。?(3)微生物污染?造成污染的病原菌主要包括外部污染菌和内源菌。?应该严格按照无菌

3、操作，取材时应选择嫩梢、新芽或胚作为外植体材料，对外植体进行彻底消毒。(4)品种限制一些植物很容易通过组织培养进行无性繁殖。目前被子植物组织培养成功的比较多。5、愈伤组织80脱分化后的植物细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团，称之为愈伤组织6、人工种子85人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。7、细胞融合132细胞融合(Cellfusion)是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。8、

4、多倍体与单倍体146多倍体(polyploid)：是指个体细胞中含有超过正常染色体组数的个体。是由Winkler于1916首先使用的。(1)产生原理主要是体细胞在有丝分裂的过程中，染色体完成了复制，但是细胞受到外界环境条件（如温度骤变）或生物内部因素的干扰，纺锤体的形成受到破坏，以致染色体不能被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是就形成染色体数目加倍的细胞。（2）诱导方法单倍体：细胞中含有正常体细胞的一半染色体数，即具有配子染色体数目的个体。花药和花粉培养（Antherandpollenpulture）指离体培养花药和花粉

5、,形成花粉植株，从中鉴定出单倍体植株并使之二倍化的细胞工程技术。由于花粉（雄配子，n）的染色体只有体细胞的一半，因此获得的植株是单倍性的。9、植物组织培养制备次生代谢产物172（一）毛状根培养生产次级代谢产物毛状根（hairyroots）是发根农杆菌（Agrobacteriumrhizogenes）感染双子叶植物后，形成的类似头发一样的根组织。许多植物的毛状根在离体培养条件下表现出次生代谢产物的合成能力，产物产量较正常植物及悬浮培养细胞的要高。因此Ri质粒可应用于有价值的次生代谢产物的生产。1.毛状根产生机制发根农杆菌之所以具有

6、这种致根性，是因为它具有能诱导毛状根产生的Ri(Rootinducing)质粒。当发根农杆菌感染植物时Ri质粒上的T-DNA可以转化并插入到植物细胞基因组中。2.毛状根诱导方法(1)外植体接种法(2)茎杆接种法(3)原生质体一农杆菌共培养法(-)冠瘦组织培养生产次级代谢产物冠瘦组织(Crowngalltissue)是由根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)感染引起的植物肿瘤组织，它能在无外加植物激素的培养基上生长。冠瘦组织形成与根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)上的Ti质粒有关

7、。Ti质粒上也有一段特殊的T-DNA,编码细胞分裂素合成酶基因ipt(trnsr)以及生长素合成酶基因iaaM(trnsl)>iaaH(trns2)oT-DNA指导的生长素与分裂素的合成导致了转化植物形成冠瘦组织。毛状根生产次级代谢产物的影响因素当前制约毛状根在药用植物有效成分生产中应用的主要因素：毛状根诱导率毛状根发酵培养技术：一些物理因素（如光强、温度）和化学因素（如培养基、碳源、氮源、激素、前体、诱导子等）均会对毛状根的增殖和次生代谢物质的合成产生影响。生物反应器生物合成途径不清楚10、动物细胞体外生长的特点与动物细胞培养

8、方式206特点：动物细胞比微生物细胞大，无细胞壁，对机械搅拌或剪切力敏感。动物细胞生长缓慢，易受污染。正常细胞培养的世代数有限，只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。动物细胞间主要以聚集体形式存在，大多需要贴附在载体表面才能生长。动物细胞培养方式动物细胞培