生物学常用试剂配制.doc

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1、常用试剂储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。0.5MEDTA（PH8.0）组分浓度:0.5mol/LEDTA（MW：372.24）配制量:500ml配制方法:1．称取93gNa2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器

2、上充分搅拌。3．用NaOH调节调节pH值至8.0（约需加入20g固体NaOH），当pH接近8.0时，EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。4．高温高压灭菌后，室温保存半年。5MNaCl组份浓度：5mol/LNaCl(MW：58.5)配制量：1L配制方法：1.准确称取氯化钠292.5g，置于1L的蓝盖瓶中。2.用去离子水溶解并稀释至1L。3.高温高压灭菌后，常温保存。2.5MCaCl2组份浓度：2.5mol/LCaCl2(MW：110.98)配制量：50ml配制方法:1.准确称取氯化钙g于50ml的conicaltube中。2.用去离子水溶解并稀释至500ml，用0.

3、22μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conicaltube。3.贮存于4℃。50%甘油组分浓度：50%(V/V)glycerol配制量：100ml配制方法:1.量取下列试剂，置于250ml蓝盖瓶中：100%glycerol50ml2.加入50ml去离子水，充分搅拌溶解。3.高温高压灭菌，4℃保存。4.使用时，到超净台分装。Amp-氨苄青霉素（钠盐）放置：置于4°C冰箱配方及配法：配成200mg/ml的1000*溶液储存(40g溶于200ml蒸馏水中)，溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（200ug/ml）加入培养基。Kan-卡那

4、霉素（硫酸根）放置：置于试剂柜配方及配法：配成20mg/ml的1000*溶液储存(4g溶于200ml蒸馏水中)，溶解后在超净台用注射器过滤灭菌分装，置于-20°C冰箱第二层，以1*的终浓度（20ug/ml）加入培养基。DTT（二硫苏糖醇）放置：置于-20°C冰箱顶层配方及配法：1MDTT的配制：溶解7.7gIPTG于50mL水中，溶解后分装成1。5ml管，置于-20°C冰箱第二层使用浓度为1-10MmPMSF（苯甲基磺酰氟）放置：试剂柜0.1MPMSF的配制：分子量174.19保存室温保存，配成PMSF溶液后需-20℃保存。配制溶解0.87g的PMSF于足量的异丙醇中，定容

5、到50ml。分成小份贮存于―20℃。工作浓度1mM注意：有毒，对呼吸道粘膜、眼睛和皮肤有很强的危害性，配制时请在通风橱进行，并穿实验服及戴一次性手套。10×TEBuffer（pH8.0）组份浓度:100mMTris-HCl，10mMEDTA配制量:1L配置方法1.量取下列溶液，置于1L蓝盖瓶中。1.0MTris-HClBuffer（pH8.0）100mL0.5MEDTA（pH8.0）20mL2.向蓝盖瓶中加入约800mL的去离子水，均匀混合。3.将溶液定容至1L，高温高压灭菌。4.室温保存半年。注意：此为贮存液，使用时稀释100倍，用于PCR纯化和质粒提取后产物保存。0.5

6、MPIPES（PH6.7）配制量：10ml（MW:302.4）配制方法：1.称取1.5g，加入到15ml塑料离心管内。2.加8ml的水，搅拌溶解。3.用5MKOH调PH至6.74.0.22um滤膜过滤，-20℃保存。1.5MTris-HCl（pH8.8）组份浓度:1.5mol/LTris-HCl配制量:1L配制方法:1.称取181.7g的Tris-base（MW：121.14）置于1L蓝盖瓶中。2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调pH值至8.8。4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后，室温保存半年。1.0MTris-HCl（pH8.0）组分浓度:1

7、.0mol/LTris-HCL配制量:1L配制方法:1.称取121g的Tris-base（MW：121.14）于1L蓝盖瓶中，2.加入900ml的去离子水，充分搅拌均匀，3.用浓盐酸调pH值至8.0，每升约需40-50ml浓盐酸，用水调整终体积至1L。如需其他PH的Tris，根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸。4.高温高压灭菌后，室温保存半年。注意：测PH时需使用温度补偿电极，因为温度变化对Tris的PH有很大影响。浓盐酸的体积（ml）8.6142128.53846566671.376pH9.08.88.