蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳配方.doc

《蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳配方.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、ResolvingGel6%8%10%12%15%5mL10mL5mL10mL5mL10mL5mL10mL5mL10mLH2O2.6mL5.3mL2.3mL4.6mL1.9mL4mL1.6mL3.3mL1.1mL2.4mL30%mix1mL2mL1.3mL2.7mL1.7mL3.3mL2mL4mL2.5mL5mL1.5MTrispH8.81.3mL2.5mL1.3mL2.5mL1.3mL2.5mL1.3mL2.5mL1.3mL2.5mL10%SDS50uL100uL50uL100uL50uL100uL50uL100uL50uL100uL10%APS50uL100u

2、L50uL100uL50uL100uL50uL100uL50uL100uLTEMED4uL8uL3uL6uL2uL4uL2uL4uL2uL4uL分离胶；一块胶配5mLStackingGel5%2mL5mLH2O1.46mL3.6mL30%mix330uL830uL1.5MTrispH6.8170uL420uL10%SDS20uL50uL10%AP20uL50uLTEMED2uL5uL每一块胶需要约4mL,留出约2-3cm的距离，用水封口，防止空气接触。室温放置30min后，可以看到水和胶的界面重新出现。弃去上层水，倒入凝缩胶。凝缩胶：一块胶配2mL10%(W/V)

3、过硫酸铵1称取1gAPS2加入10mL去离子水3储存于4℃可使用两周时间，过期失去催化作用。5*Tris-GlycineBuffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)1.Tris15.1gGly94gSDS5g2加入800mL去离子水，搅拌溶解3定容至1L，室温保存。5*SDS-PAGELoadingBuffer1.10ml离心管1MTris-HCl(pH6.8)1.25mLSDS0.5gBPB25mg甘油2.5ml2加去离子水溶液后定容至5mL3小份（500uL/份）分装后，于室温保存4使用前将25uL的2-ME加到每小份中5加入2-ME的LoadingBuffer

4、可在室温下保存一个月左右。