干细胞移植离临床应用治疗小儿心脏疾病还有多远？ppt课件.ppt

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1、重庆医科大学儿童医院心内科（400014）重庆医科大学先天性心脏病介入诊治中心干细胞移植离临床应用治疗小儿心脏疾病还有多远？田杰陈沅朱静吕铁伟张蕾白永红HowfarisittotheclinicalapplicationofstemcelltransplantationinthetreatmentofpediatricheartdiseaseDeteriorationofpumpfunctionHeartfailureCriticallossoffunctionalcardiomyocytesAdultcardiomyocyteslackp

2、rominentregenerativecapacityAlternativetherapeuticwaysMedicationPalliativesurgeryMechanicalwaysHearttransplantationCelltherapy--StemCellTransplantation干细胞治疗心血管疾病目前实验研究的状况干细胞基础研究—临床应用的先导干细胞来源胚胎干细胞（embryonicstemcell,ESC）成体干细胞(adultstemcell,ASC)骨髓来源（造血干细胞、间充质干细胞等）marrowmesench

3、ymalstemcell,MSCs肝脏、血管内皮来源其它（骨骼肌、脂肪、心肌来源等）MSCs的分离方法密度梯度离心法贴壁筛选法流式细胞仪分离法其它（免疫磁珠法等）AvailableEasilytobeproliferatedLabel;geneticmanipulationImmuneprivilegesintransplantation：Escapehostrejection*易获取*易扩增*易标记,易于基因操作*宿主免疫耐受AdvantagesofMSCsintherapy吕铁伟，田杰等，骨髓间充质干细胞体外适宜分离和培养条件的研究。重

4、庆医科大学学报2004；29:856-859沈兴，余更生，田杰等兔骨髓间充质干细胞体外分离培养及冻存研究。实用医学杂志2006；9：996－997CultureandlabelMSCsculturedfor24hours×200MSCsculturedfor3days×200Mouse吕铁伟，田杰等，骨髓间充质干细胞体外适宜分离和培养条件的研究。重庆医科大学学报2004；29:856-859沈兴，余更生，田杰等兔骨髓间充质干细胞体外分离培养及冻存研究。实用医学杂志2006；9：996－997Cultureandlabel新西兰兔原代培养

5、5天（×200）移植前的骨髓MSCs(×100)MSCslabeledbyDAPI（×200）DAPI的细胞标记(×100)combinedAandBdouble-labelingrateis90±5%MSCsdouble-labeledwithDAPIandBrdUDAPI标记BrdU标记重叠同一视野，双标记率为90±5%DAPIstainingnucleiofMSCsImmunostainingofBrdU通过实验已证实：MSC在体外微环境（体外加5-氮杂胞苷培养或加心肌细胞混合培养等）的诱导作用下，能够分化为心肌样细胞，并从形态学、组织

6、学等方面给予特异性鉴定（包括心肌特异性蛋白如MHC,Cx43,Titin等和特异性基因Nkx-2.5、GATA-4等的检测）MSC体外分化为心肌样细胞MSC治疗心脏病的基础－－可分化有功能的心肌细胞5aza诱导后的MSCs(200)5aza诱导前的MSCs(200)MSCs诱导后MHC的检测（200）MSCs诱导后Cx43的检测（200）Cardiomyogenicdifferentiationofhumanendometrialprogenitorcells通过实验已证实：MSCs在体内微环境（通过直接移植MSCs到正常、心肌梗塞或

7、心肌病心衰活体动物模型的左心室壁心肌组织内）的诱导作用下，能够分化为心肌样细胞，并从形态学、组织学等方面给予特异性鉴定（包括心肌特异性蛋白如MHC,cTnI,Cx43等和特异性基因Nkx-2.5、GATA-4等的检测）MSC体内分化为心肌样细胞MSC治疗心脏病的基础－－可分化有功能的心肌细胞吕铁伟，田杰，陈沅等，骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞的实验研究。细胞生物学杂志2004；26(2)：197-203MSC植入后（DAPI×200）MSC植入后（HE×200）MSC植入后Cx43的检测(×200）MSC植入后MHC的检测(×200）

8、干细胞移植的种类异种异体移植同种异体移植同种同体移植细胞移植方法心内膜心肌注射开胸心肌注射外周血管注射冠状动脉注射开胸心肌注射冠状动脉注射阜外医院：比较两种不同途径