微生物知识总结说课讲解.doc

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1、微生物学实验复习1、培养基的种类及用途：标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离、鉴定、计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产、连续培养化学合成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产半合成培养基部分天然物质和部分化学试剂配制而成兼有天然培养基和合成培养基的优点目的用途加富培养基营养物质仅适合一种或一类微生物能使某种微生物的生长、繁殖比其他微生物更加迅速、逐渐淘汰其他微生物鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加(或缺少)某种化学成分菌种的分离

2、2、培养基中的营养物质：营养要素含义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质无机化合物：CO2、NaHCO3；有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定 无机盐为微生物提供除碳、氮元素以外的各种重要元素，包括某些大量元素细胞内的

3、组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂 3、培养基的配置原则：(1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别为：6.5～7.5、7.5～8.5和5.0～6.0。4、灭菌与消毒：项目概念常用方法应用的范围消毒使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体上绝大多数微生物(包括病原微生物和有害微生物的营养细胞)煮沸消

4、毒法：在100℃煮沸5～6min一般物品巴氏消毒法：70～75℃煮30min或在80℃煮15min一些不耐高温的液体，如牛奶化学药剂消毒法如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线消毒法：30W紫外灯照射30min接种室项目概念常用方法应用的范围灭菌使用强烈的物理或化学方法使物体内外所有的微生物永远丧失其生长繁殖能力灼烧灭菌：酒精灯火焰接种工具的灭菌干热灭菌：160～170℃下灭菌1～2h玻璃器皿、金属工具的灭菌高压蒸汽灭菌：121℃条件下，灭菌15～30min培养基及容器灭菌5、细菌培养基的配制过程？答：配制培养液→调节PH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面（搁置斜面的长度不超过试管总长

5、的1/2）【问题与探究】（1）培养基灭菌后，为什么需要冷却到50℃左右时，才能用来搁置斜面或倒平板？你用什么办法来估计培养基的温度？【提示】　琼脂的凝固点为40℃，温度太高易使培养皿破裂，低于40℃，培养基已凝固，倒不出，所以培养基灭菌后，需冷却到50℃左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基的试管，感觉试管的温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。（2）为什么需要使试管口通过火焰？【提示】　通过灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染培养基。（3）为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项？【提示】　使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先的空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注意高压

6、蒸汽灭菌锅的压力(100kPa)、温度(121℃)和灭菌时间(20min)。6、无菌操作和接种技术(1)接种概念：在_无菌条件下将微生物接入培养基____的操作过程。工具：玻璃刮铲、接种针和接种环。方法：穿刺接种、斜面划线接种和平板划线接种、涂抹平板等。（2）无菌操作——微生物接种技术的关键①培养微生物用的试管、培养皿和微生物培养基等，在接种之前都需要灭菌_。②通常接种操作要在____酒精灯火焰__的附近进行。【想一想】在微生物的培养过程中为什么要进行无菌操作？提示：无菌操作的目的是防止受到空气中的杂菌污染。7、微生物的分离（1）原理：根据微生物对_营养成分、氧气、pH等要求的不同

7、，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入某些抑制剂使非目的微生物不能生长，从而达到选择分离微生物的目的。(2)方法①据菌落形态特征初步分离涂抹平板法②常用方法——平板分离法平板划线法分类目的：在培养基上得到目的微生物的单个菌落【归纳】无菌技术的具体内容(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。(3)实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。(4)实验操作时应避免已灭菌处理的