急性白血病实验室诊断分型程ppt课件.ppt

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1、急性白血病实验室诊断分型程序急性白血病(AL)的诊断除临床症状、体征与血象外，骨髓细胞形态学分类是确诊AL的主要依据之一。急性白血病因分型不同，导致治疗方案和疗效不同，预后也不同，因而正确诊断分型非常重要。日常工作中急性白血病的诊断分型常因骨髓取材、制片或经验不足而造成漏检，也可能由于染色、形态学鉴别能力或未按程序进行而致误诊，从而引发医疗纠纷。急性白血病实验室诊断分型程序为了提高急性白血病的实验室诊断水平，减少医患之间的矛盾，在“举证倒置”情况下，应做到程序明确，证据充足。参照国际血液学标准化委员会(ICSH)[1]、英国血

2、液学标准制定委员会(BCSH)[2]及欧州白血病免疫分型研究组(EGIL)推荐的方法，结合我国国情，提出适合基层临床实验室急性白血病诊断分型程序如下。急性白血病实验室诊断分型程序一、形态学和主要细胞化学染色我国的实验室目前已推行了FAB协作组分型方案，形态学分型都严格执行1986年天津会议提出的分型诊断标准。这种标准尽管不够完善，但简便易行，已为国内广大血液学工作者所接受。单纯的骨髓细胞形态学有主观因素，其诊断符合率常为60%~70%，若结合细胞化学染色，可使诊断符合率接近90%。急性白血病实验室诊断分型程序1.骨髓涂片取有骨

3、髓小粒部分，制备厚薄、长短适宜的涂片数张，同时作外周血涂片数张。2.染色虽然国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用纯化天青B和伊红Y的Romanowsky染色，限于天青B难以买到和价格较贵的原因，提倡使用瑞（Wright）—姬（Giemsa）染色，兼取两种染色之优点进行骨髓涂片染色。（一） 骨髓细胞形态学诊断程序急性白血病实验室诊断分型程序1.镜检严格按先低倍视野后油镜观察的步骤进行形态学分析，分类计数至少200个有核细胞。2.分型注意事项（1）原始细胞典型形态的鉴别十分重要。按天津会议精神，原粒细胞应分两型：Ⅰ型为典型原

4、粒细胞；Ⅱ型具有典型原粒细胞特征，但胞质中出现少量、细小嗜天青颗粒。急性白血病实验室诊断分型程序（2）伴随细胞：白血病细胞难以判断类型时，可观察伴随细胞形态学特点，有利于原始或早期细胞形态的鉴别。（3）非红系细胞（NEC）：急性髓细胞白血病（AML）分型应强调NEC，准确计数原始细胞的比例。急性白血病实验室诊断分型程序（4）Auer小体：仔细寻找涂片中Auer小体有利于AML的诊断，一般认为急性淋巴细胞白血病（ALL）Auer小体缺如。（5）丝状分裂：ALL白血病细胞有丝分裂染色体短而粗，且占细胞绝大部分，可供分型时参考。急性

5、白血病实验室诊断分型程序（6）浆细胞：急性单核细胞白血病（AMoL）时，浆细胞出现率高于其他类型白血病，对急性白血病分型具有参考意义。（7）核影：也称篮细胞，多数出现在治疗前骨髓中，为ALL特征之一，但决非特异性的。（8）分型应以骨髓象为准，血象仅供参考。但在白血病细胞识别困难时，观察血象中白血病细胞分化程度，有助于细胞类型的正确判断。急性白血病实验室诊断分型程序从事急性白血病诊断的实验室都应采用细胞化学染色方法。ICSH提出使用髓过氧化物酶（MPO）、氯乙酸AS-D萘酯酶（CAE）和α-乙酸萘酯酶（ANAE）三种染色，必要时

6、再加苏丹黑B（SBB）染色。BCSH则主张使用SBB或MPO和非特异性酯酶（NSE）染色。（二） 主要细胞化学染色诊断程序急性白血病实验室诊断分型程序史敏等[3]以ICSH推荐的三种主要细胞化学染色对110例急性白血病骨髓标本进行观察，结果表明基本符合专家小组设定的模式。从我国实际情况出发，同时考虑到患者的经济负担，细胞化学染色选项宜少的原则，主要细胞化学提倡使用两项，MPO（SBB）、α-NAE（ANAE）见表1。急性白血病实验室诊断分型程序表1主要细胞化学染色结果MPO（SBB）α-NAE（ANAE）诊断说明+-AML-M

7、1、M2++/-AML-M3M3a的ANAE阳性++AML-M4、M5+/-+AML-M5--/+分类不明、ALL、AML-M7部分T-ALL、M7ANAE阳性急性白血病实验室诊断分型程序1.髓过氧化物酶MPO是髓系特征的专有酶，应作为识别髓系细胞的首选。一般原粒细胞多为阴性，有的可阳性，阳性率>3%，有助于诊断AML。ICSH增补SBB意义在于MPO-的AL时SBB可提供诊断依据。急性白血病实验室诊断分型程序2.非特异性酯酶：α-乙酸萘酯酶（α-NAE）和酸性α-乙酸萘酯酶（ANAE）均属非特异性酯酶，其基质液都是α-乙酸萘

8、酚，前者要求PH为7.6，后者PH为5.9~6.3。单核细胞系为阳性反应，并对氟化钠敏感。急性白血病实验室诊断分型程序1.3.方法学评价（1）髓过氧化物酶染色方法较多，国内多使用Washburn法，由于联苯胺有致癌作用，ICSH推荐使用3，3’-二氨基联苯胺的配方，目前国内已