成都医学院卫生检验与检疫专业免疫学检验重点.doc

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1、免疫(immunity):是机体对抗原性异物的识别和应答,是机体识别和消除抗原性异物的重要手段。免疫系统:由免疫器官,免疫细胞及免疫分子组成。免疫器官有:中枢免疫器官--骨髓,胸腺。外周免疫器官--淋巴结,脾脏。免疫细胞:1.淋巴细胞(Tcell,Bcell,NKcell),2.单核巨噬细胞(血液中的单核细胞和组织中的巨噬细胞),3.参与免疫应答的细胞(中性粒,嗜酸,嗜碱粒,肥大细胞)。抗体:(antibody,Ab)是体液免疫应答产生的主要效应分子,由B淋巴cell或记忆B淋巴cell经抗原刺激后增殖分化成的浆细胞产生,主要存在于血清等体液中。补体:(c

2、omplement,C)是存在于血清、组织液和细胞表面的经活化后的有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白,故统称为补体系统细胞因子:(cytokine,CK)是细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。免疫应答反应:1.固有免疫,2.适应性免疫抗原表位(epitope):是指存在于抗原分子表面的,能与T/B细胞抗原受体或抗体特异性结合,决定抗原特异性的特殊化学基团。半抗原(hapten):仅能与相应的抗体发生特异性结合反应,但不能单独诱导机体产生抗体。人工抗原:由大分子物质(称为载体)和半抗原组成的抗原。共同抗原表位:不同抗原之间存在的相

3、同或相似抗原表位。共同抗原:具有共同抗原表位的不同抗原交叉反应:如果甲乙两种抗原是共同抗原,那么由甲抗原刺激机体产生的抗体,不但能够与甲抗原上相应的抗原表位发生特异性结合,而且能够和乙抗原上相同的抗原表位结合的现象。免疫球蛋白的基本结构:由两条重链和两条轻链通过二硫键结合而成的Y字形双边对称结构,称为Ig单体。可变区:在Ig近N端轻链1/2和重链1/4(γ链、α链、б链)或1/5(μ链,ε链)区域内(约110个氨基酸),氨基酸的组成和序列变化比较大。恒定区:在Ig近C端轻链1/2和重链3/4(γ链、α链、б链)或4/5(μ链,ε链)区域内,氨基酸的组成和序

4、列在同一种属的同一类Ig中相对稳定。免疫球蛋白的水解片段:意义:1.用于研究免疫球蛋白的结构和功能。2.避免超敏反应。常用的有1.木瓜蛋白酶水解片段(将IgG分子从重链二硫键N端219位置上断裂,生成两个相同的Fab片段和一个Fc片段)。2.胃蛋白酶水解片段(将IgG分子从重链间二硫键C端232位置上断裂,形成一个F(ab')₂片段和一些无生物活性的小分子多肽碎片pFc'片段)各类免疫球蛋白的特点:IgG:是血清和细胞外液中含量最高的Ig,唯一可透过胎盘传输给胎儿,半衰期最长(23天),出生后3个月开始合成,5岁达成人水平。IgM:是个体发育过程中最早合成

5、和分泌的Ig(胚胎晚期开始合成),是分子量最大的Ig,血型抗体,凝集反应。IgA:分为血清型(单体),免疫作用弱和分泌型(二聚体),在黏膜局部抗感染免疫中发挥重要作用。IgD:是Bcell分化成熟的标志。lgE:是正常人血清中含量最低的Ig,参与Ⅰ型超敏反应,半衰期最短,可能与机体抗寄生虫免疫有关。抗原抗体反应的特点:1.特异性。2.比例性(在等价带前后分别为抗体过剩或抗原过剩,形成的沉淀物少或无,这种现象在免疫测定中称为“带现象”,出现抗体过量时,称为前带;抗原过剩时,称为后带)。3.可逆性。(抗原抗体复合物解离取决于两方面的因素,一是抗体对相应抗原的亲

6、和力,二是环境因素对复合物的影响)。4.阶段性。细胞破碎的方法:反复冻融法;超声破碎法;表面活性剂处理法;自溶法;溶菌酶处理法。抗原的分离和纯化:层析法:1.凝胶过滤层析;2.离子交换层析;3.亲和层析。蛋白质类载体:常用的有人血清白蛋白(HAS),牛血清白蛋白(BSA),兔血清白蛋白(RSA),牛甲状腺球蛋白(BTG)。多克隆抗体:(polyclonalantibody)是由机体的多个Bcell克隆产生的针对多个表位的混合抗体。免疫佐剂(immunaodjuvan)指同抗原一起或预先注射到机体内,能增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免

7、疫增强性物质,简称佐剂。作用机制:1.改变了抗原的物理形状,降低抗原在体内的分解速度,延长抗原与免疫细胞的作用时间,从而增强抗原的抗原性;2.佐剂对细胞膜有活化作用,可增加巨噬细胞和淋巴细胞的通透性,促进其对抗原的有效处理;3.直接刺激参与反应的细胞,并使之增生,扩大和增强免疫应答能力;4.促进单核/巨噬细胞活化,释放细胞因子,调节和增强淋巴细胞的应答能力。单克隆抗体(monoclonalantibody,McAb):是指由一个B细胞系(克隆)所产生的抗体,仅能结合特定抗原的一个表位。单克隆抗体制备的原理:杂交瘤技术(体外细胞融合技术,获得免疫小鼠脾细胞与

8、恶性浆细胞融合的杂交瘤细胞,能产生仅针对某一特定表位的抗体。)沉淀

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