微免实验复习整理(图文详尽版本).doc

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1、（一）实验一■大吞噬现象、小吞噬现象吞噬功能的测定计数方法：①吞噬百分率:计数100个中性粒细胞中具有吞噬作用的细胞数,即为吞噬百分率。②吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计数被吞噬的细菌总数，求平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。·大吞噬现象要认识“巨噬细胞”·小吞噬现象主要认识“中性粒细胞”（马蹄状形）（二）实验二■淋巴细胞转化试验（原理、分型、意义）1、原理：T淋巴细胞可以在分裂剂的刺激下，向母细胞转化。促分裂剂能选择性地激发T淋巴细胞合成DNA与细胞分裂。转化百分率正常值为70%左右2、分裂相：即染色体型3、母细胞：较小淋巴细胞

2、大4-5倍；核质疏松呈网状结构，有1-3个核仁；核周透明区；胞浆嗜碱性，有空泡4、过渡型：较小淋巴细胞略大；核质略疏松；着色较淡5、小淋巴细胞：核质致密；着色深；胞浆少6、意义：体外淋巴细胞转化反应，可为测定机体细胞免疫状态的指标之一。■E玫瑰花环实验1、原理：T细胞表面有绵羊红细胞受体，可在自然情况下与绵羊红细胞结合，形成E玫瑰花环，由此可区分T淋巴细胞与B淋巴细胞2、判定结果：凡是淋巴细胞周围围绕4个以上绵羊红细胞者为阳性■血清学反应1、基础：抗原决定簇——抗体的互补决定区2、特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性3、抗原抗体反应因素：电解质

3、、温度、酸碱度4、抗原或抗体的检测方法：凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术I凝集反应：（直接、间接）概念：抗原+抗体=凝集团块直接凝集：颗粒性抗原+抗体=凝集团块（玻片法、试管法）⑴直接凝集反应——玻片凝集反应①定性；用已知抗体检测颗粒性抗原；细菌的诊断和分型，红细胞ABO鉴定②出现白色凝集块，属于阳性反应⑵直接凝集反应——试管凝集反应（半定量，诊断伤寒副伤寒）间接凝集：可溶性抗原包被于载体+抗体=凝集团块反向间接凝集：抗体包被于载体+抗原=凝集团块协同凝集：抗体结合金葡菌SPA+抗原=凝集团块II沉淀反应：（单项、双向）概念：可溶性抗原+抗体=

4、沉淀物①单向琼脂扩散单向琼脂扩散试验是一种定量试验。将一定量已知抗体混于琼脂中，制板，在适当位置打孔，将抗原加入孔中扩散，与板中抗体相遇，在比例合适处呈现白色沉淀环，环的直径与抗原含量成正比。主要用于测定血清各种Ig和补体成分的含量②双向琼脂扩散可用于分析和鉴定标本中多种抗原成分（抗原、抗体同时扩散（自由、定向）③对流免疫电泳在相应抗原抗体孔之间可见白色沉淀线。④火箭电泳：抗原定量试验（抗体琼脂板、抗原扩散（自由、定向）将一定量已知抗体混于琼脂中，制板，在板的一端打一排小孔，加入待检样品，置于阴极端进行电泳。抗原在泳动过程中与抗体在比例合适部位

5、形成锥形沉淀峰，状如火箭，称火箭电泳。沉淀峰的高低与抗原的浓度成正比。敏感度与单扩相仿，但需时较短。III直接凝集反应—玻片凝集（三）实验三■补体结合实验■中和反应实验：（病毒中和实验、毒素中和实验）略■免疫标记技术：1、概念：将已知抗体标记上显示性物质，通过检测标记物，反映有无抗原抗体反应，从而间接测出微量的抗原或抗体。2、原理：免疫标记技术是在免疫学、生物化学及显微镜术进展的基础上发展起来的一项技术，具有特异、敏感、快速的特点。将荧光色素（常用异硫氰基荧光黄，简称FITC）与特异性抗体（或抗原）以共价键基团牢固结合，但不影响该血清抗体的免疫

6、特性。这种荧光标记的抗原抗体复合物，可通过荧光灯源中产生的紫外光或蓝紫光激发产生荧光，而从荧光显微镜加以观察。3、常用的标记物有：酶、荧光素、放射性同位素、胶体金、生物素、电子致密物等。■ELISA（酶联免疫吸附试验）1、原理：把抗原抗体的免疫反应和酶（主要有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等）的高效催化作用有机地结合起来，并仍保持其免疫和酶的活性。结合在抗原抗体复合物上的酶在遇到相应的底物时，可以催化底物水解、氧化或还原，从而产生有色的物质。颜色反应的深浅与抗体或抗原的量成正比。2、方法：主要有间接法（用于测抗体）和双抗体夹心法（用于测抗原）。■革

7、兰染色1、意义：对细菌鉴别、选择抗菌药物、研究细菌致病性等有重要意义。2、原理：与细菌细胞壁有关，尚未完全阐明。阴性—红色阳性—蓝色■细菌学总论①细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物，形体微小，一般以微米（µm）作为测量单位。②细菌按其外型可分为球菌、杆菌、螺型菌三大类。③不同种类的细菌大小不一，大多数球菌直径约1µm，杆菌长2∼5µm，宽0.3∼1µm。④细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、芽孢、菌毛【实验】毒力试验：（Elek平板）——鉴定分离出的细菌能否产生外毒素①方法：在含血清的琼脂平板中央贴上一条浸有白喉抗毒素血清的滤纸条，将待检菌垂直划过滤纸

8、条接种②现象：如产生外毒素，则产生白色沉淀线（毒素与抗毒素特异性结合）③本质：抗原抗体沉淀实验【实验】细菌划线分离、药物敏感试验（观察抑菌圈的直径，m