沉降菌的测试方法.docx

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1、沉降菌:用标准提及的方法收集到的活微生物粒子,通过专用的培养基,在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。测试方法:本测试方法采用沉降法,即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿(一般多采用90mm直径硼硅酸玻璃培养皿,俗称沉降碟),经若干时间,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室(区)的洁净度。人员职责:洁净室的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式,外面的衣服不能带进以上的区域。测试步骤:1、测试前培养皿表面必须严

2、格消毒。2、将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置,然后从里到外逐个打开培养皿,使培养基表面暴露在空气中。3、静态测试时,培养皿暴露时间为30min以上;动态测试时,培养皿暴露时间不大于4h。4、全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。5、采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配置的培养皿经采样后,在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于2d。6、每批培养基应有对照试验,试验培养基本身是否污染。可每批选定三只培养皿作对照培养。注意事项:1、测试用具要作灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。2、采取一切措施防止人为对样本

3、的污染。3、对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。4、由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并注意细菌菌落和培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。5、采样前应仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。测试条件:测试之前,要对洁净室相关参数进行预先测试,参数包括:1、温度和相对湿度的测试。2、室内送风量或风速的测试或压差的测试。3、高效过滤器的泄露测试。测试状态:静态和动态均可进行测试。静态测试时,室内测试人员不得多于2人。沉降菌测试前,被测

4、洁净室由使用者决定是否需要预先消毒。测试报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。最少采样点数及采样点位置分布:1、沉降菌的采样点参照GB/T16292-20102、采样点的位置规则3、最少培养皿数:在满足最少采样点数目的同时,还宜满足最少培养皿数,见下表。1、采样次数:每个采样点一般采样一次。采样注意事项1、对于单向流洁净室或送风口,采样器采样口朝向应正对气流方向;对于非单向流洁净室,采样口向上。2、采样布点时,至少应尽量避开尘粒较集中的回风口。3、采样时,测试人员应站在采样口的下风侧,并尽量少走动。4、应采取一切措

5、施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。5、培养皿在用于检测时,为避免培养皿运输或搬动过程造成的影响,宜同时进行对照试验,每次或每个区域取一个对照皿,与采样皿同法操作但不需暴露采样,然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养,结果应无菌落生长。记录测试报告应包括以下内容:1、测试者的名称和地址,测试日期。2、测试依据。3、被测洁净室的平面位置4、有关测试仪器及其测试方法的描述:包括测试环境条件,采样点数目及布置图,测试次数,或可能存在的测试方法的变更,测试仪器的检定证书等,若为动态测试,则还应记录现场操作人员数量及位置,现

6、场设备运转数量及位置。5、测试结果:包括所有统计计算资料。结果评定:1、每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限。2、在静态测试时,若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准,则应重新采样两次,两次测试结果均合格才能判为符合。

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