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1、羊肚菌多糖的初级分离纯化摘要摘要:目的研究羊肚菌多糖的分离纯化。方法通过超声水提醇沉的方法提取其多糖,经水提得到的羊肚菌粗多糖通过脱色,Sevage法进行脱蛋白,经DEAE-52离子交换柱层析,用纯水、0.1、0.3、0.5、0.7mol·L-1NaCl溶液和0.1、0.3、0.5mol·L-1NaOH溶液进行阶段洗脱。结果得到六种组分TAP-1、TAP-2、TAP-3、TAP-4、TAP-5、TAP-6,其得率分别是24.56%、18.72%、2.32%、15.08%、6.57%、2.48%。结论得到不同的多糖,其中中性多糖占上样量的24.56%,酸性多糖占上样
2、量的42.69%,碱性多糖占上样量的2.48%。关键词:羊肚菌;多糖;分离纯化AbstractAbstract:ObjectiveTostudytheisolationandpurificationofPolysaccharidesfrommorchella.Methodbyultrasonicwaterprovidedalcoholprecipitationmethodforextractionofthepolysaccharide,withwaterprovidedfromMorchellapolysaccharidebydecoloration,Sevage
3、methodofremovingproteinandbyDEAE-52ionexchangechromatography,thepurewater,0.1,0.3,0.5,0.7mol-L-1NaClsolutionand0.1,0.3,0.5mol-L-1NaOHsolutionphaseelution.ResultssixcomponentsTAP-1,TAP-2,TAP-3,TAP-4,TAP-5,TAP-6,theyieldwas24.56%,18.72%,2.32%,15.08%,6.57%,2.48%,,respectively.Conclusionp
4、olysaccharidefromdifferent,whichaccountedfor24.56%oftheamountofneutralpolysaccharides,acidicpolysaccharidesaccountedfor42.69%ofthesample,theamountofalkalinepolysaccharideaccountedfor2.48%.Keywords:Morchellaessulenta;polysaccharide;separationandpurification目录引言11材料与设备11.1材料与试剂11.2仪器12方
5、法22.1羊肚菌实体多糖的提取22.2羊肚菌多糖的脱色22.3羊肚菌多糖的醇沉22.4羊肚菌多糖的脱蛋白22.5羊肚菌多糖的离子交换柱层析22.6离子交换柱的后处理33实验结果与讨论33.1结果33.2讨论44结论4参考文献5致谢6引言羊肚菌(Morchellaesculenta)隶属子囊菌亚门(Ascomycotina)、盘菌纲(Discomycetes)、盘菌目(Pezizales)、羊肚菌科(Morchellaceae)、羊肚菌属(Morchella),因其菌盖表面呈许多小凹坑,外观极似羊肚而得名[1]。羊肚菌是一种野生名贵食药用真菌,最早收录于李时珍的本草
6、纲目。中医认为其性平,味甘寒,无毒,具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能[2]。现代研究发现,羊肚菌具有很高的营养和药用价值,特别是羊肚菌多糖有降血脂、调节免疫功能、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤等作用,并能减轻癌症患者放化疗引起的毒副作用[3]。对多糖的分离提纯,国内外常采用有机溶剂沉淀法和柱层析分离法。本文通过超声,超速离心,有机溶剂沉淀、离子交换柱层析的的方法对羊肚菌多糖进行了分离提纯。1材料与设备1.1材料与试剂羊肚菌2015年5月采于青海省互助北山林场,经卢教授鉴定为正品;苯酚(分析纯,天津市大茂化学试剂厂);浓硫酸(分析纯,白银良友化学
7、试剂有限公司);氯化钠(分析纯,天津市大茂化学试剂厂);氢氧化钠(分析纯,天津市大茂化学试剂厂);浓盐酸(分析纯,白银良友化学试剂有限公司);95%乙醇(分析纯,天津市白银良友化学试剂有限公司);正丁醇(分析纯,天津市富宇精细化工化学有限公司);三氯甲烷(分析纯,天津市富宇精细化工化学有限公司),DEAE-52(分析纯,北京满仓科技有限公司);火棉胶(分析纯,天津市大茂化学试剂厂)。1.2仪器AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);FZ102粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂);TD3低速离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司);DHG-9140B电
8、热恒温鼓风