玉竹多糖的提取与测定ppt课件.ppt

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1、玉竹多糖的提取与测定实训目的与要求（1）掌握玉竹多糖的提取与测定。（2）掌握从药典资料得到某一天然药物的含量测定方法。实训原理利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛或羟甲基糖醛，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。其颜色深度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比，用分光光度法测定其含量，计算试样中粗多糖含量。仪器与材料仪器：紫外分光光度计试样与试剂：玉竹、5％苯酚溶液、硫酸实验步骤对照品溶液的制备：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品25mg，置250ml量瓶中，加适量水溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中

2、含无水葡萄糖0.1mg）。标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，分别置具塞试管中，分别加水至2.0ml。各精密加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速精密加入硫酸5ml，摇匀，放置10分钟，置40℃水浴中保湿15分钟，取出后迅速冷却至室温，以相应的试剂为空白。照紫外-可见分光光度法（附录V-A），在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。样品测定：取本品粗粉1g，精密称定。置圆底烧瓶中，加水100ml,加热回流1小时，用脱脂棉滤过，如上重复提取1次

3、，两次滤液合并，浓缩，移至100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密量取2ml,加乙醇10ml，搅拌，离心，取沉淀加水溶解，置50ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取2ml,加入5％苯酚溶液1ml，摇匀，迅速精密加入硫酸5ml，摇匀，放置10分钟，置40℃水浴中保湿15分钟，取出后迅速冷却至室温，以相应的试剂为空白。照紫外-可见分光光度法（附录V-A），在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。紫外-可见分光光度计它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析、及结

4、构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度计和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。紫外-可见分光光度计使用开机（预热30min）开始测量时要先调节仪器的零点使用时手拿比色皿的毛玻璃面，将比色皿用蒸馏水冲洗几遍，然后用待测溶液冲洗两次，然后将待测溶液加入比色皿中，加入溶液体积约为比色皿的2/3或3/4，比色皿外壁用擦镜纸擦干。选择波长。测定物质吸光度，记录吸光度值。测定结束，清理。紫外可见分光光度计注意事项开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止

5、打开样品室盖。比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。