液质联用技术的临床检验应用进展ppt课件.ppt

《液质联用技术的临床检验应用进展ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、LC-MS/MS临床检验应用进展上海市徐汇区中心医院李水军2013.10.29报告提纲液质联用技术原理国内外临床应用进展在我院的应用情况介绍同型半胱氨酸25-羟基维生素D1,5-脱水葡萄糖醇问题和展望质谱技术发展历史质谱仪组成由离子源、真空接口、质量分析器和检测器组成。根据检测器类型可分为磁质谱、四级杆质谱、离子阱质谱、傅里叶回旋共振质谱、飞行时间质谱。产生带电离子离子源真空接口质量分析器检测器引入带电离子按m/z分离和排列电信号放大样品引入数据分析LC-MS/MS仪灵敏度μg/mL灵敏度ng/mL或者pg/mLHP

2、LC,$$MS,$$$APIHighvacuumLC-MS/MS工作原理+Ionization+++MS1+MS2FragmentationDetectionLCLC-MS/MS优势特异性好，免疫分析对小分子化合物的检测缺陷比HPLC和GC-MS的容易使用，通量更大，是免疫分析法的主要互补方法与其他技术相比，单个样本的测试成本更低建立和验证新方法比较容易国外LC-MS/MS应用2000年，LC-MS/MS开始应用于药物研发领域，逐步从标准技术成为国际通用技术2010年，LC-MS/MS广泛应用于欧美临检参考实验室。由

3、于第三方检测机构的推动，从大型医院临检实验室向中小型、甚至社区医院扩展Vogeser,ClinChemLabMed2003;41:117-126.Dooley,ClinBiochem2003;36:471-481.Vogeser,ClinBiochem2008;41:649-662.LC-MS在PubMed论文发表数量临检主要应用领域新生儿筛查：氨基酸、肉毒碱、脂肪酸、有机酸药物中毒、滥用药物分析、止痛药物分析治疗药物监测：免疫抑制剂、抗癫痫药物、抗心律失常药内分泌分析：肾上腺激素、性激素蛋白鉴定和定量：C肽、PTH

4、、血管紧张素功能医学检测以美国MayoClinic为例，1998年没有LC-MS/MS。2010年，60台LC-MS/MS，200万个测试。GrebeSK,SinghRJ.ClinBiochemRev.2011Feb;32(1):5-31.LC-MS/MS国内应用现状在各大医院已普及，主要用于临床药理但在临检领域尚处于起步阶段卫生部临检中心部分医院检验科第三方检验机构质谱法常作为参考方法，用于参考测量程序和校准品定值我院应用简介2000年引进LC-MS/MS，主要用于临床药理和临床科研。2002年开始探索临检应用：同

5、型半胱氨酸、TDM、生物标志物（心血管病、糖尿病、前列腺癌）、内分泌（性激素、肾上腺激素）、维生素、氨基酸等。同型半胱氨酸(Hcy)：心血管疾病独立危险因子H型高血压增加心脑血管事件30倍051015202530ReferenceCholesterolSmokingHypertensionNoElevatedFastingHomocysteineElevatedFastingHomocysteineRiskFactorsRelativeRisk(VascularDisease)流行病学研究证明，“H型”高血压患者心

6、血管事件发生率较单纯存在高血压的患者高出约5倍，较正常人高出约25-30倍。GrahamIM,etal.JAMA.1997;277(22):1775-81.Hcy代谢HcyMetAdoMetAdoHcyTHFCH3THFCH2THFCHOTHFCysB6BHMTMTRB12B2蛋氨酸循环叶酸循环RefsumH,etal.ClinChem.2004;50(1):3-32.血中Hcy形式Hcy-AlbuminHcy-CysHcy80%bHcy20%fHcy正常tHcy5-15µmol/LHcy检测方法原理检测分析流程临床

7、研究与应用体检人群血浆/血清Hcy测定结果组别例数年龄Hcy（μmol/L）P值*正常对照组2039.9±9.913.1±3.4心脑血管病高危人群14945.0±7.920.2±12.7＜0.01糖尿病2447.2±5.921.3±12.3＜0.01住院病人血浆/血清Hcy测定结果组别例数年龄Hcy（μmol/L）P值*对照组3869.2±12.313.9±6.6脑梗塞4075.0±9.422.0±14.9＜0.01冠心病4579.3±5.818.3±7.9＜0.05高血压4871.1±10.316.8±7.8＜0.

8、05LiS,etal.JChromatogrB.2008;870(1):63-67卫生部临床检验中心2011年全国同型半胱氨酸EQA循环酶法和LC-MS/MS法结果差异明显，Bias从10.64%至21.80%循环酶法的室间差异较大，CV9.10-12.61%。合作开发检测试剂盒国内首个获得SFDA批准，具有自主知识产权的液相色谱串联质谱HCY