第十四章 特异性抗体的制备技术

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1、第十四章　特异性抗体的制备技术Chapter14PreparationofSpecificAntibody第一部分教学内容和要求一、目的要求·掌握：特异性抗体的类型、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理；熟悉：常用颗粒性和蛋白质抗原制备的方法、多克隆抗体制备的的影响因素，常用佐剂种类；了解：抗血清的鉴定，基因工程抗体的类型。二、教学内容1．常见免疫原的种类和制备及佐剂。2．免疫血清的制备，抗血清的鉴定与保存。3．单克隆抗体制备技术。4．基因工程抗体技术。第二部分测试题一、选择题（一）单项选择题（A型题）1.配制绵羊红细胞免疫原一般细胞浓度为A.102/mlB.104/mlC.105/m

2、lD.106/mlE.108/ml2．细菌鞭毛免疫原常规的制备方法A．0.5%甲醛处理B．100℃加温2h处理C．1%氯化钙处理D.75%乙醇处理E.2%氯肪处理3.细菌的菌体免疫原常规的制备方法A.75%乙醇处理B.100℃加温2h处理C.0.5%甲醛处理D.1%氯化钙处理E.2%氯肪处理4.要从组织和细胞匀浆中粗提某种蛋白抗原，最常用又简便的分离方法A.盐析法B.凝胶过滤法C.离子交换层析法D.免疫亲和层析法E.免疫电泳法5.制备人工抗原时，最常用于偶联半抗原的载体A.免疫球蛋白B.人甲状腺球蛋白C.人血清白蛋白D.牛血清白蛋白E.葡萄球菌A蛋白6.蛋白质抗原首次免疫接种后，最好

3、间隔多长时间再进行第二次免疫A.7~10天B.10~20天C.20~30天D.30~60天E.三个月7.鉴定抗体的效价，最好采用下列哪一种方法A.间接凝集试验B.单向免疫扩散法C.双向免疫扩散法D.免疫亲和层析法E.聚丙烯酰胺凝胶电泳法8.纯化特异性抗体时，可采用下列哪种方法除去杂抗体A.盐析法B.凝胶过滤法C.离子交换层析法D.免疫亲和层析法E.免疫电泳法9.根据抗原分子所带电荷不同进行分离纯化的方法称为A.盐析法B.凝胶过滤法C.离子交换层析法D.免疫亲和层析法E.免疫电泳法10。单克隆抗体目前效果较好的纯化方法A。亲和层析法B。凝胶过滤法C。离子交换层析法D。超速离心法E。盐析

4、法11.完全佐剂的组成A.液体石蜡+羊毛脂B.羊毛脂+氢氧化铝C.液体石蜡+卡介苗+氢氧化铝D.卡介苗+氢氧化铝+羊毛脂E.卡介苗+液体石蜡+羊毛脂12.要使半抗原与载体结合具有免疫原性、半抗原分子的数目数至少要达到A.10个以上B.15个以上C.20个以上D.50个以上E.100个以上13．颗粒性抗原免疫接种方法一般采用A．淋巴结注射B．静脉注射C．皮内注射D．皮下注射E．肌肉内注射14。免疫小鼠采血通常采用A．心脏采血或断尾法B．颈动脉放血或断尾法C．颈静脉或摘除眼球采血D．摘除眼球或断尾法E．耳静脉采血或摘除眼球15．较长时间(4~5年)保存抗体，通常采用A．4℃保存B．-10

5、℃保存C．-20℃保存D．-30℃保存E．真空干燥保存16．在HAT选择培养基中可长期存活者是A．细胞多聚体　B．融合的脾细胞与瘤细胞C．融合的瘤细胞与瘤细胞D．未融合的瘤细胞E.未融合的脾细胞17。单克隆抗体目前效果较好的纯化方法A。亲和层析法B。凝胶过滤法C。离子交换层析法D。超速离心法E。盐析法（二）多项选择题（X型题）1．从组织细胞中提纯某可溶性抗原，一般需经过下列哪些步骤A.破碎细胞B.选择性沉淀C.亲和层析D.与载体偶联E.纯度鉴定2．可用于破碎组织细胞制备可溶性抗原的方法有A.超声破碎法　　　B.冻融法C.超速离心法　D.酶处理法E.表面活性剂处理法3．提取蛋白质免疫原

6、所用的沉淀法包括A.盐析法B.高分子聚合物沉淀法C.有机溶剂沉淀法D.核酸沉淀法E.醋酸沉淀法4．提取蛋白质免疫原的技术有A.选择性沉淀B.超速离心C.凝胶层析D.离子交换层析E.亲和层析5．免疫血清制备的过程A．选择免疫动物B．免疫方法C．动物采血D．免疫血清的纯化E．抗血清的鉴定6．单克隆抗体纯化的方法A。亲和层析法B．凝胶过滤法C．离子交换层析法D．超速离心法E．盐析法7．单克隆抗体制备的流程A．抗原的免疫和细胞融合B．抗体初筛与克隆化C．杂交瘤细胞的冻存与复苏D．单克隆抗体的批量生产E．单克隆抗体的纯化与鉴定8．用于抗血清的免疫球蛋白片段的主要制备方法A．分离非共价键法B．分

7、离共价键法C．溴化氰裂解法D．酶裂解法E．乙醇裂解法9．目前认为佐剂增强免疫应答的机理A.增加抗原的表面积和改变抗原构型B.佐剂与抗原结合改变抗原的物理性状C.增强巨噬细胞的吞噬作用D.佐剂与抗原结后直接激活NK细胞发挥效应E.直接激活B细胞产生抗体二、填空题1．.根据抗体制备的技术方法不同进行区分，人工制备的抗体可分为＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿　三大类型。2．抗血清鉴定的主要内容包括＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿