微生物的培养和应用ppt课件.ppt

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1、1·1微生物的培养和应用一、微生物培养基的配制1、培养基定义:培养基(培养液)是为人工培养微生物而制备的,提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。思考:微生物细胞的元素组成是什么?2·类型(1)按物理状态分:固体培养基、液体培养基、半固体培养基。区别:加入琼脂的量决定培养基的形态。熔点:96度凝固点:40度注意:一般细菌不能利用琼脂。应用微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落用途:纯化、计数、鉴定液体培养基:工业生产表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基:观察运动无动力有动力(弥散)例、下列叙述不正确的是A培养基是

2、为微生物的生长繁殖提供营养的基质B液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同C微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌B.C.(2)按成分分:天然培养基、合成培养基和半合成培养基。依据:成分是否明确判断下列培养基按成分属于何种培养基?牛肉膏、蛋白胨培养基葡萄糖铵盐培养基马铃薯蔗糖培养基(3)按功能分:基础培养基、选择培养基和鉴别培养基。基础培养基:含有微生物生长所需的基本物质。选择培养基:培养基加入某种物质或缺少某种营养物质而抑制不需要的微生物生长,促进需要微生物生长。举例说明:加链霉素培养基作用加青霉素培养基作用无氮培养基作用鉴别培养基:区别微生物伊红——美

3、蓝产气杆菌菌落大、灰棕色大肠杆菌菌落小、绿色金属光泽抗生素,抑制细菌按功能状态分选择培养基鉴别培养基基础培养基从众多微生物中分离所需的微生物鉴别不同种类的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌伊红—美篮培养基使大肠杆菌的菌落呈深紫色,可以鉴别大肠杆菌几种选择培养基:加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物微生物生长需要条件1、夏天为什么食物容易腐败?如何处理可以防止腐败?2、为什么真空包装的食品不容易腐败?3、醋酸是否具有杀菌作用?以上反应了微生物生长受到哪些

4、条件影响?细菌30~37霉菌25~28放线菌25~281~2d3~4d5~7d大肠杆菌乳酸菌破伤风杆菌大多数细菌为好氧型霉菌5.0~6.0细菌6.5~7.5放线菌7.5~8.5微生物的类群原生生物:原核生物:真菌:病毒:如酵母菌、霉菌单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物无细胞结构真核细胞细菌、蓝藻等原核细胞3.培养基营养成分:不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质。讨论:为什么大多数培养基都含有这四类物质?(1)基本成分:碳源无机碳源:有机碳源:CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物氮

5、源无机氮源:有机氮源:NH4+、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等自养微生物异养微生物1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方(2)特殊营养:细菌生长必需,而往往自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基等(3)pH、氧气等要求碳源可作为碳源的物质有:含碳无机物:含碳有机物:蛋白质脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同异养型微生物的碳源为自养型微生物的碳源为碳酸盐、碳酸氢盐、二氧化碳糖类(主要)含碳有机物(有机碳)含碳无机物(无机碳)氮源可作为氮源的物质有:含氮无机物:b.含氮有机物:蛋白胨牛肉膏尿素氮气氨气硝酸盐铵盐二、无菌操作1、获得纯净培养物的关键:2、无菌操作防止外

6、来杂菌的入侵1、下列细菌中,能利用含碳无机物作碳源的是A光合细菌B根瘤菌C硝化细菌D乳酸菌2、培养大肠杆菌的培养基中,必需含有的碳源和氮源是A糖、有机酸等B二氧化碳、碳酸盐C蛋白质D无机氮化物A.CA.C二.无菌技术(思考)1.什么是无菌技术?包括哪些方面?2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?3.消毒和灭菌有何不同?4.常用的消毒和灭菌方法有哪些?5·哪些地方有菌可能导致菌体感染?操作者培养基、接种工具、器皿空间无菌技术:泛指培养微生物操作中,所有防止杂菌污染的方法。无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。1、灭菌和消毒1.)灭菌:

7、强烈的因素杀死所有微生物,包括芽孢和孢子。思考:哪些因素可以灭菌、消毒?物理——高温、紫外线化学——酒精、氯气、石碳酸2.)消毒:温和的因素杀死一部分对人体有害的微生物。举例:煮沸问题:一段时间后为什么会腐败?不包括芽孢和孢子3).常用的消毒方法:煮沸消毒法,巴氏消毒法,紫外线或化学药剂消毒法4)常用的灭菌方法:灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌:100kPa121℃15-30min牛奶接种室、接种箱或超净工作台接种工具,接种环、接种针或其他金属用具玻璃器皿(吸管、培养皿)思考:以下应当用何种方法灭菌、消毒?

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