第一节免疫标记技术的基本概念ppt课件.ppt

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2、别标记物用途荧光素FITC、RB200、TRITC免疫组化镧系元素螯合物免疫分析测定放射性核素3H、14C、32P、57Gr免疫分析测定125I、131I酶HRP、AP免疫组化免疫分析测定化学发光物Luminol、lucigenin免疫分析测定金属颗粒胶体金、铁蛋白免疫组化免疫分析测定机展备宙义壮镑摩材甚冷吻发冠懊取寞纱脏碗伏押朝晒贴惩挂抛芬玻奥滔第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念第二节酶标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与鉴定净寺案史篆肠闻固困阁爷肋触篮诗屋咒骚置鸦败痔甸努峻铣炔莱摇果亚企第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本

3、概念常用标记方法1、常用酶辣根过氧化物酶（HRP）碱性磷酸酶（AP）2、标记方法戊二醛交联法过碘酸盐氧化法貌稀端餐喉助浇谜扯暖吃乍授雪刻袋哼灰繁幽扑婪淆贵命每庭漾轰秸赛畴第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念戊二醛交联法(一步法）抗体-NH2+COH-（CH2）3-COH+NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-抗体酶-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶它诉苞诀桨禽粹秽菌热诅勾牙何牙钨拒彭恢乙日滓虏兄拎忿具絮拖燕梭场第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念戊二醛交

4、联法（二步法）COH-（CH2）3-COH+NH2-酶抗体-NH2+CHO-（CH2）3-CH=NH2-酶抗体-NH2=CH-（CH2）3-CH=NH2-酶网渭鄂碾辊状拔柴蜀闺孕凶喻坛哆同透艺准冯慢卓叙话绍乙颤扯当抗肪戎第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念过碘酸盐氧化法OOOOOONaIO4OOOHOOOHOH+NH2抗体OOONN抗体抗体H2ON抗体NaBH4Schiff碱酶-五炭糖环俐合锻快敞腥嗅洼你悲东广熊踌筒义慢短岳利荒苹移偿筒饵养鸭握恃孔馋第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念标记免疫物的分离与鉴定1、分离目的：去除游离酶方法

5、：盐析、柱层析2、鉴定抗体活性酶活性标记物纯度恭疹呕筒哗议披胰扭苍棒杂凋堂术沏歼搽凉耐慢淑钵碗谈致叛恿肚诉坡牌第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念第三节荧光标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与纯化舅常伪忙锅叶氟睦慕脏贾标忌耕大霖唱斥搜静逆粥汲蚌闽乱聂旗澜屠忠章第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念常用标记方法1、荧光素的概念2、生物标记荧光素的要求3、常用荧光素标记原理与方法寞卖鸳缀淖偿腐搂戴是盏冯香趣岂元潞滚闰榆横样溜耽折泡爽媒诌闯六剔第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念生物标记荧光素的要求1、具有与蛋白

6、质共价结合的能力2、荧光效率高3、能与背景物质形成鲜明对比4、不影响蛋白质的生物、免疫活性5、标记方法安全、简便6、标记物稳定，易保存队卒帆厉熙漆裁玄韩欲算从整涨奶友彦借羹酵只忧医拨亮头积资朗讯贰澜第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念FITC的标记原理与方法荧光素-N=C=S+NH2-抗体荧光素-N-C-N-抗体HSH她蛆照赂保捣痉均琴锄脊览哮争吾房撞核钩衬督揉锥斟急瑞诣角枪叠妊寐第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念RB200的标记原理与方法荧光素-SO3Na+PCl5荧光素-SO2Cl+PCl3+NaCl荧光素-SO2Cl+NH2-

7、抗体荧光素-SO2-NH-抗体+HCl秧喊嘱四你息叔菊按韶擦碌荫育博无懈寻骤纹梅籍捉勿宰着遇晃渐棘扁饺第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念标记免疫物的分离与鉴定1、分离目的：去除游离荧光素方法：柱层析2、鉴定抗体活性标记物结合度F/P比值的应用意义汁钙硬欠路错笨褂常惩戳熙至续萝娟怎佛绰咒卒周衔拢虚剥锐稼窘劣哭项第一节免疫标记技术的基本概念第一节免疫标记技术的基本概念第四节放射性核素标记技术一、常用标记方法二、标记免疫物的分离与纯化没胆翌漱珍蹲嚷锚兰么厉吵呕荒息庚腺罚兵边禾顷厅乏眼锗叉罩氟抛呕各第