非发酵菌讲义教学讲稿

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1、非发酵菌非发酵菌（nonfermenters）主要是指一大群不发酵糖类、专性需氧、不产生芽孢的革兰阴性杆菌。常见的非发酵菌假单胞菌属金氏杆菌属产碱杆菌属黄杆菌属无色杆菌属艾肯菌属莫拉菌属土壤杆菌属非发酵菌的特点1.多为机会致病菌2.存在于自然环境3.为正常菌群的一部分4.对抗生素有天然的耐药性非发酵菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别1.4%KOH拉丝试验2.万古霉素（5ug/片）敏感试验例外无色杆菌（Vd群）和放射土壤杆菌的拉丝实验可能为假阴性，但对万古霉素耐药。莫拉菌和不动杆菌的某些种别上述两试验均可出现假阴性。辨认非发酵菌的基本方法

2、1.KIA的反应2.细胞色素氧化酶阳性3.不能在Mac培养基上生长非发酵菌的初步分群1.葡萄糖的利用2.在Mac培养基上的生长能力3.细胞色素氧化酶的产生4.动力假单胞菌属假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，DNAG+C为58～71mol％，包括200余种菌。多数为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。分类按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA同源群有关的种，其中第1群可分为：荧光假单胞菌DNA同源群、斯氏假单胞菌DNA同源群、产碱假单胞菌DNA同源群，包括铜绿假单胞等12个菌种。临

3、床意义假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中均有存在，人类非发酵菌感染中，假单胞菌占70％～80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。微生物学特性G-直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞有荚膜、有端鞭毛或丛鞭毛。专性需氧，生长温度范围广4～42℃，最适生长温度为35℃，普通培养基上生长，产生各种水溶性色素，如绿脓素、脓玉红素、绿脓菌荧光素、脓褐素。对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药。药物敏感试验由NCCLS/CLSI推荐，由FDA通

4、过的假单胞菌抗生素选用标准分为四组：A组常规用药包括---头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林、B组选择性报告的药物为头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星、C组选择的药物为头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素。D组或U组仅用于尿路感染羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、增效磺胺铜绿假单胞菌（Pseudomonas.aeruginosa)铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传播途径和污染，因此易感染，特别在由各种原因所致的人体抵抗力低下时引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染等，亦可导致菌血症

5、、心内膜炎、囊性纤维变性，该菌引起的慢性肺部感染占有较大的比例；在AIDS病中，常发生感染。感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以致引起角膜穿孔而失明。在假单胞菌属的感染中铜绿假单胞菌的感染占70％。生物学性状革兰阴性杆菌，呈球杆状或长丝状，一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞，有荚膜。可以产生水溶性荧光素及绿脓素。可生长温度范围20-42度，4度不生长。抗原结构：有O抗原和H抗原，O抗原包含外膜蛋白、脂多糖。外膜蛋白是保护性抗原，脂多糖具有特异性。目前铜绿假单胞菌可分为20个血清型。培养特点专性需氧，生长温度范围为20-42℃，最适

6、温度为35℃，致病性铜绿假单胞菌可在42℃生长，4℃不生长，对营养无特殊要求。1.普通琼脂平板2.血琼脂平板3.Mac平板4.SS平板5.肉汤形成菌膜色素1.绿脓素2.青脓素（荧光素）3.红脓素4.黑脓素（约占3%）生化特征氧化酶（+），氧化分解葡萄糖、木糖产酸，不产气。产红脓素或黑脓素的菌株以及黏液型菌落的菌株可能不分解葡萄糖。液化明胶，分解尿素，能利用枸橼酸盐，不产生吲哚，能还原硝酸盐为亚硝酸盐，或产氮气。抗原结构有O抗原和H抗原，O抗原包含外膜蛋白、脂多糖。外膜蛋白是保护性抗原，脂多糖具有特异性。目前铜绿假单胞菌可分为20个血

7、清型。分型血清学、噬菌体和细菌素分型变异菌落形态的变异光滑型（S）粗糙型（R）黏液型（M）毒力因子包括结构成分、毒素和酶黏附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸而促进细胞侵入。多糖荚膜：抗吞噬细胞吞噬，并可使细菌粘附于宿主细胞表面。内毒素外毒素：可以产生多种生物损伤，干扰细胞代谢，抵抗细胞吞噬。绿脓素：由绿脓杆菌RpoS基因编码产生，可催化超氧化物及过氧化氢产生有毒的物质，导致机体损伤。弹性蛋白酶：能降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血，促进细菌的扩散。磷脂酶C：分解磷脂和卵磷脂，损伤组织细胞膜。抵抗力强耐药性强细菌学检验1

8、．标本采集按疾病和检查目的，分别采取不同的标本：患者的血液、脑脊液、胸(腹)水、脓液、分泌液、痰、尿液、十二指肠引流液、粪便等；医院病区或手术室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器械及生活用品。2．标本镜检为革兰阴性，有动力的杆菌3．分